前言 先天性肛门直肠畸形(Congenital anorectal malformations, ARMs)是常见的消化道畸形,其发生率在,1500—5000名新生儿中一例。它包括一广泛的疾病谱,从最轻症的膜状肛门到严重的泄殖腔畸形,其病理改变非常复杂。对于它的治疗,无论从急诊纠正畸形还是术后远期便秘和便失禁的治疗均为临床治疗难题。目前对于正常肛门直肠的胚胎发育的演变规律和肛门直肠畸形在胚胎期发生的具体机制均不明确。 维生素A类似物作为一种必需的营养物质,其代谢物参与包括视力、生殖、生长、细胞分化、免疫功能以及胚胎发育等体内的许多生理过程。饮食中维生素A缺乏或摄入过量的维生素A均可能引起临床上一系列与维生素A代谢异常相关的病理状态。在正常的胚胎发育过程中维持恰当的维生素A水平是很重要的,在孕期维生素A缺乏和过多地应用维生素A类物均可能导致胚胎畸形产生,其中即包括肛门直肠畸形。 因此利用维甲酸这一维生素A类似物最常见的活性形式诱导产生肛门直肠畸形动物模型并进行发病机制的研究,可以弥补临床标本的不足并克服伦理学方面的束缚,从胚胎学和分子生物学方面来探讨维生素A类物与肛门直肠畸形之间的相关性。本实验包括以下几个方面内容:① 肛门直肠畸形动物模型的建立:在大鼠怀孕的特定时期,经口投以一定量的维甲酸,诱导产生胎鼠肛门直肠畸形动物模型,并观察其伴发畸形,总结其规律,来探讨它们可能存在的共同的胚胎发生机制。② 维甲酸诱导大鼠肛门直肠畸形胚胎中RABmRNA表达的研究:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测对照组和畸形组胚胎中尾侧部分的维甲酸受体(RAR)各亚型mRNA的表达模式,从而探讨维生素A信号途径与肛门直肠畸形发生之间的相关性与具体机制。③ 维甲酸诱导大鼠肛门直肠畸形演变规律及Hoxd-13基因表达的研究:连续观察肛门直肠畸形胚胎发生过程中病理形态学变化并且采用原位杂交技术检测大鼠肛门直肠畸形胚胎中Hoxd-13