正中神经电刺激对脑外伤昏迷大鼠γ-氨基丁酸b受体表达变化的影响

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目的:通过正中神经电刺激(Median Nerve Stimulation,MNS)治疗脑外伤昏迷大鼠,探讨其前额叶皮质γ-氨基丁酸b受体(γ-aminobutyric acid b Receptor,GABAb R)表达及与阿立新(Orexin)系统的关系,初步探讨MNS对TBI后昏迷促醒的作用及可能机制,并探讨Orexin在脑外伤昏迷促醒中是否具有“开关”作用。方法:将SD大鼠分为空白对照组、假刺激组、MNS组、阿立新1受体(Orexin1Receptor,OX1R)拮抗剂SB-334867组。应用MNS治疗脑外伤后昏迷大鼠,观察其行为学变化,实验完成后6h、12h、24h每组每个时间点各处死10只大鼠用蛋白质印迹(Western Blot)技术及免疫组织化学检测大脑前额叶皮质GABAb R的表达。结果:各组均按经典的意识状态分级法行行为学评估,大鼠经“自由落体撞击法”造模后出现与临床昏迷状态相似的行为学变化,经MNS后表现出短暂的行为觉醒反应。其中空白对照组意识状态全部为Ⅰ级,假刺激组为(5.33±0.758)级,刺激组为(3.80±1.064)级,SB-334867组为(4.67±0.844)级,四组的意识状态分级呈“空<刺<拮<假”递增趋势,组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western Blot结果显示同一组三个时间点的前额叶皮质GABAb R表达均呈“6h<12h<24h”趋势,其中空白对照组及刺激组三个时间点间差异无统计学意义(P>0.05),假刺激组及SB-334867组三个时间点间差异有统计学意义(P<0.05)。而同一时间点四组的GABAb R表达呈“刺<空<拮<假”递增趋势,空白对照组与刺激组比较差异无统计学意义(P﹥0.05),其余同一时间点四组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化结果显示三个时间点的前额叶皮质GABAb R表达呈“6h<12h<24h”趋势,两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。而四组的GABAb R表达呈“刺<空<拮<假”递增趋势,两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:正中神经电刺激具有促醒作用,其机制可能与降低前额叶皮质中的GABAb R表达有关,且Orexin系统可调控前额叶皮质中的GABAb R的表达达到促醒作用,表明Orexin在脑外伤昏迷促醒中可能具有“开关”作用。
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