【摘 要】
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目的探究炎症微环境下微小RNA-30a（miR-30a）调控Runt相关转录因子2（Runx2）对人牙周膜干细胞成骨分化的影响。方法体外培养人牙周膜干细胞（hPDLSCs）,随机分为对照组、模型组、miR-30a mimics（模拟物）组、miR-30a mimics阴性对照组、miR-30a inhibitor（抑制剂）组、miR-30a inhibitor阴性对照组,除对照组外,其余各组以脂多
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目的探究炎症微环境下微小RNA-30a（miR-30a）调控Runt相关转录因子2（Runx2）对人牙周膜干细胞成骨分化的影响。方法体外培养人牙周膜干细胞（hPDLSCs）,随机分为对照组、模型组、miR-30a mimics（模拟物）组、miR-30a mimics阴性对照组、miR-30a inhibitor（抑制剂）组、miR-30a inhibitor阴性对照组,除对照组外,其余各组以脂多糖诱导细胞炎症微环境,构建体外炎症模型,然后分组处理并诱导其成骨分化,采用碱性磷酸酶（ALP）及茜素红染色检测各组细胞成骨分化情况;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平;采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各组细胞miR-30a、成骨相关基因Runx2 mRNA表达水平;采用蛋白免疫印迹实验检测各组细胞Runx2、骨桥蛋白（OPN）、骨钙素（OCN）蛋白表达情况。结果与对照组相比,模型组细胞miR-30a表达、细胞上清液中TNF-α及IL-6水平升高（P<0.05）,Runx2 mRNA表达水平、ALP阳性细胞相对比例、矿化结节相对比例、Runx2、OPN及OCN蛋白表达水平降低（P<0.05）。与模型组相比,miR-30a mimics组细胞miR-30a表达、细胞上清液中TNF-α及IL-6水平升高（P<0.05）,Runx2 mRNA表达水平、ALP阳性细胞相对比例、矿化结节相对比例、Runx2、OPN及OCN蛋白表达水平降低（P<0.05）;miR-30a inhibitor组细胞miR-30a表达、细胞上清液中TNF-α及IL-6水平降低（P<0.05）,Runx2 mRNA表达水平、ALP阳性细胞相对比例、矿化结节相对比例、Runx2、OPN及OCN蛋白表达水平升高（P<0.05）;miR-30a mimics阴性对照组、miR-30a inhibitor阴性对照组细胞各指标无明显变化（P>0.05）。结论炎症微环境下hPDLSCs中miR-30a高表达,可下调Runx2表达,促进炎症进展,进而抑制hPDLSCs成骨分化。
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