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生物分子是生物体的重要组成成分,主要分为生物大分子和生物小分子。其中,生物大分子为蛋白质、核酸(DNA、RNA)以及多糖等,生物小分子为ATP、激素、神经递质、单糖、脂类等。生物分子在新陈代谢中具有供给生命需要的能量与物质、传递信息、控制胚胎分化、促进生长发育、产生免疫功能等功能。因此,对生物分子的高灵敏检测是生命科学中永恒的核心课题。本论文主要利用石英晶体微天平做了三个方面的探究:一、运用以酶循环放大技术的石英晶体微天平检测ATP。二、运用滚环复制放大技术,实现了对溶菌酶的检测。三、构建了一种基于杂交链式反应来检测靶DNA的传感器。本论文主要研究内容如下: 1、基于酶循环信号放大石英晶体微天平技术检测ATP 三磷酸腺苷(ATP)是细胞生命活动的必备物质,三磷酸腺苷是体内组织细胞一切生命活动所需能量的直接来源。因此检测细胞中的ATP含量具有重要的意义。设计了以纳米金为载体结合酶循环放大构建的石英晶体微天平DNA传感器来检测ATP。将适体固定在磁珠上,利用适体与靶ATP韵特异性结合作用,释放出链替代聚合反应位点,在工具酶的作用下,生成大量的单链DNA,生成的单链DNA将生物条码置换到溶液中。生物条码被捕获到修饰的芯片上,利用频率信号的变化实现对ATP的检测。 2、基于滚环复制放大的石英晶体微天平检测溶菌酶 溶菌酶是一种碱性酶,可以破裂细胞壁而导致细菌溶解,由于它可与带负电荷的病毒蛋白结合,从而导致病毒失活,因而具有抗菌、抗病毒等作用,由此可见研究细胞中的溶菌酶含量具有重要的意义。结合滚环复制放大技术与链替代聚合放大技术,利用QCM实现对溶菌酶的检测。首先将适体修饰到石英晶体的芯片上,适体与溶菌酶结合后释放出单链DNA,在聚合酶作用下,通过链替代聚合反应将锁扣DNA链释放出来,与模板链互补杂交,在聚合酶作用下,引发滚环复制反应。引入与滚环长链互补的探针提高了检测信号,实现对溶菌酶的检测。 3、基于杂交链式反应的石英晶体微天平检测DNA 在临床诊断、环境监测以及生物防御方面对DNA的高灵敏高选择性检测是非常重要的。设计了一种新的石英晶体微天平检测DNA的方法:将发卡DNA固定在芯片表面,靶DNA与发卡互补杂交,发卡打开后引发杂交链式反应,将生物素修饰的DNA结合到芯片,实现对DNA的检测。