目的:验证回回甘松饮对高糖条件下肾小球系膜细胞、肾小球内皮细胞的早期保护作用,探讨回回甘松饮通过调控系膜细胞中相关自噬信号通路(TIMP3-STAT1-FoxO1信号通路)以及内皮细胞中相关自噬信号通路(TGF-β1-BAMBI)减轻肾小球损害的分子机制,为早中期糖尿病肾病治疗提供新思路。方法:选用永生系小鼠肾小球系膜细胞(SV40 MES 13)、小鼠肾小球内皮细胞(MGECs),使用30mmol/l高糖液为高糖模型组,将2种细胞各分为5组,予以空白血清和回回甘松饮含药血清干预,采用CCK-8法分别检测不同含药血清对高糖诱导的SV40 MES 13、MGECs2种细胞的活力。采用流式细胞术检测SV40 MES 13、MGECs2种细胞各组的细胞周期和细胞内ROS;MDC荧光染色法检测SV40 MES 13、MGECs这2种细胞自噬发生率;分别采用蛋白质印迹法(Western Blot;WB)技术,检测系膜细胞中(TIMP3、STAT1、FoxO1、)及内皮细胞中(TGF-β1、BAMBI)和LC3、p62在2种细胞内的表达。结果:1.HGY对高糖状态下肾小球系膜细胞功能学研究结果细胞CCK-8结果显示:在干预的48 h时,与模型组相比,HGY给药组对肾小球系膜细胞的增殖有一定抑制作用,其中高剂量组抑制效果最明显(P<0.01)。检测细胞周期显示:与模型组各期相比,HGY高剂量组可使系膜细胞发生G1/S期阻滞(P<0.01)。流式细胞术检测细胞内ROS显示:HGY高剂量组ROS水平低于模型组(P<0.01)。MDC染色法观察自噬发生率:HGY高剂量组荧光强度及数量高于Mod组(P<0.01)。2.HGY对高糖状态下肾小球内皮细胞功能学研究结果在HGY给药组干预的48 h时,高剂量组OD值明显低于模型组,对肾小球内皮细胞的增殖有一定抑制作用(P<0.01)。细胞周期显示:HGY高剂量组G1期、S期的细胞比例高于模型组(P<0.01)。流式细胞术检测ROS显示:HGY高剂量组ROS水平低于模型组(P<0.01)。MDC染色法观察自噬发生率:HGY高剂量组荧光强度及数量高于Mod组(P<0.01)。3.HGY调控高糖条件下的系膜细胞内相关自噬分子机制研究结果Western blot结果显示:与模型组相比HGY组LC3表达量显著高于模型组(P<0.01),p62表达量低于模型组(P<0.01);与模型组相比TIMP3、STAT1、FoxO1蛋白表达量下降(P<0.05)。4.HGY调控高糖条件下的内皮细胞中相关自噬分子机制研究结果Western blot结果显示:HGY中LC3表达量高于模型组,HGY中p62表达量高于HGY组并趋于空白组(P<0.01)。与模型组相比,HGY组TGF?1表达量下降(P<0.05),BAMBI蛋白表达升高(P<0.05)。结论:1.HGY对高糖状态下肾小球系膜细胞、内皮细胞早期具有保护作用2.HGY在高糖状态下对SV40 MES 13细胞能够通过下调TIMP3、STAT1、FoxO1蛋白表达,激活TIMP3-STAT1-FoxO1通路促进系膜细胞自噬的发生,改善肾小球损害过程。3.HGY在高糖状态下对MGECs细胞可以通过上调BAMBI的表达,下调TGF-β1,激活TGF-β1-BAMBI通路促进细胞自噬,减轻肾小球损害过程。