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1背景随着工业和道路交通的快速发展,各种致伤因素导致的开放性骨折,术后合并骨感染临床较为常见,一旦发生骨感染,若处理不当,容易转变为慢性炎症,经久不愈。外科清创是治疗创伤性骨感染的重要手段,然而过度清创去除大块(段)游离感染骨所导致的骨缺损,给治疗带来了新的难题。尽管临床对于骨缺损的治疗手段较多,但是对于大块(段)游离感染骨的处理仍缺乏理想的方法,无法充分的再利用,造成了极大的浪费。2目的针对感染性大块(段)骨再利用的问题,我们试图通过建立骨感染动物模型,以’感染骨段为研究对象,对其进行灭菌处理,探索感染骨段异位再血管化的可行性,为保留病骨二期回植创造条件。3方法3.1第—部分：兔胫骨骨感染模型制作以中国白兔为研究对象,参照沈霖、卢旻鹏等兔胫骨慢性骨髓炎动物模型原理,建立兔胫骨骨感染模型。20只中国白兔随机分为两组。在兔左侧胫骨中上段,胫骨粗隆下1.5cm处钻孔(直径约2mm),适当抽出部分髓腔内容物,将纱布条作为异物植入动物胫骨髓腔内。实验组：将0.3m1浓度为3×108cfu/ml金黄色葡萄球菌悬液(ATCC25923)注入填塞胫骨髓腔内的纱布条；对照组：注入0.3m1无菌生理盐水。钻孔处以骨蜡封闭,逐层缝合切口。死亡动物及时补充。于术后1周、2周、4周分别观察记录其一般情况,行解剖学、微生物学及病理学检测。3.2第二部分：感染骨段灭菌处理及再血管化以中国白兔为研究对象。70只中国白兔随机分为三组,其中实验组与对照组各30只,空白组10只。实验组先按照第一部分方法制造胫骨骨感染模型并检测,对照组不做任何处理。实验组：选取模型制作成功的实验动物,以钻孔处为中心向两端截取1.5cm长感染胫骨,碘伏浸泡30min后无菌生理盐水冲洗并取标本培养。胫骨残端清创,去除坏死的软组织,碘伏浸泡胫骨断端创面30min,小腿短缩后,6孔钢板固定。设计以隐动脉为营养血管,将灭菌后骨段移植至同侧隐动脉滋养的股内侧肌与股直肌肌间隔处。对照组：直接选用健康家兔胫骨,方法同实验组。空白组直接取双侧健康胫骨行组织病理切片。术后4周,6周,8周分别观察记录一般情况,行墨汁腹主动脉灌注、解剖学观察,组织病理切片观察,镜下计算骨内血管管腔数量,进行统计学处理。4结果4.1第—部分术后1周实验组：一般情况差,动物后肢创面红肿明显,有淡黄色液体渗出,体毛无明显生长。对照组：一般情况可,动物后肢皮肤愈合良好,体毛再生良好。术后2周实验组：一般情况可,动物后肢皮肤发红、肿胀加重,创面不愈合,部分伤口裂开,干痂形成,可见脓性分泌物,触之有波动感。创面彻底清创消毒后,切开皮肤及皮下组织,暴露胫骨钻孔部位,可见组织间及骨髓腔内有大量白色脓性分泌物溢出,多部位取标本进行微生物培养,提示有金黄色葡萄球菌生长。取出填塞之纱布条,截取钻孔部位胫骨段,病理切片提示大量中性粒细胞浸润。对照组：一般情况好,运动良好,动物后肢皮肤完全愈合,体毛覆盖完全。同实验组操作方法,术野未见脓性分泌物,微生物培养没有细菌生长。骨组织病理切片提示少量中性粒细胞浸润。术后4周实验组：一般情况好,动物后肢皮肤肿胀基本消失,创面大部分已愈合,慢性溃疡创面形成,可见少许脓性分泌物。切开皮肤及组织间隙仍可见少量脓性分泌物溢出,微生物培养提示有金黄色葡萄球菌生长,胫骨钻孔骨折端周围骨组织硬化,骨膜反应明显。截取胫骨段病理切片提示有大量淋巴细胞浸润。对照组：基本恢复术前状况,动物后肢皮肤已完全愈合,骨痂生长良好。病理切片显示同正常骨组织。4.2第二部分实验组与对照组大腿手术部位均未出现感染现象,伤口一期愈合。术后4周实验组与对照骨段两端髓腔及骨骼钻孔部位有少量新生肉芽组织与周围软组织相连,结合不紧密,骨表面形成一层结缔组织薄膜,易分离。骨表面光滑平整,腹主动脉墨汁灌注后,可见散在点片状墨染区域。骨组织病理切片见有少量带血细胞团及墨汁团的血管管腔,血管数量两组间差异无统计学意义(P>0.05),与空白组相比差异无统计学意义(P>0.05)。术后6周两组骨段均可见表面结缔组织薄膜增厚,与周围软组织结合紧密不易剥离,出现部分骨质吸收,骨表面平整度下降。墨汁灌注后见骨皮质表面墨染面积增大,且分布不均匀,骨骼钻孔处、骨折端靠近肌肉软组织丰富的部位墨染面积大。骨组织病理切片可见大量带血细胞团及墨汁团的血管管腔。血管管腔数量对照组多于实验组(P<0.05),两组血管数量均多于空白组（P<0.05)。术后8周两组骨段均表面形成较厚结缔组织膜,与周围软组织结合紧密。墨染范围扩散至全骨表面及整个髓腔。骨组织病理切片见带血细胞团及墨汁团的血管管腔密集分布,血管管腔数量两组间差异无统计学意义(P>0.05),两组血管数量均多于空白组(P<0.05)。同组内血管管腔数量,随着时间的延长而逐渐增加(P<0.05)。5结论5.1第—部分0.3m1浓度为3×108cfu/ml金黄色葡萄球菌悬液(ATCC25923)联合异物(纱布条)植入兔胫骨中段可形成有效的骨感染模型。5.2第二部分兔感染骨段经碘伏浸泡处理,能够达到理想的灭菌效果。灭菌后的感染骨段移植至同侧隐动脉滋养的股内侧肌与股直肌肌间隔处,6-8周可见大量的新生血管长入骨段,建立血液循环,完成再血管化过程。