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背景:胶质母细胞瘤(Glioblastoma,GBM)是最常见、恶性程度最高、也是预后最差的原发性恶性脑肿瘤。当前主要的治疗手段为最大程度手术切除肿瘤组织联合术后放射治疗及替莫唑胺化疗,但即便接受最理想的治疗后,患者中位生存期也仅有14.6个月。microRNAs(miRNAs)是一类参与转录后基因调控的小分子非编码RNA,它由一条引导链(miRNA)和一条随从链(miRNAd*)组成。大量研究表明miRNAs在细胞分化、增殖和凋亡等多种生物学过程中起着重要的作用。过去研究观点认为,只有作为引导链的miRNA被选择性地加载到Argonaute(AGO)蛋白上,之后进一步装配到miRNA诱导的沉默复合体(miRISC)中,与靶基因mRNA结合,进而发挥相关调控作用,而随从链因为其较低的表达水平被解旋酶降解。但是,近年来发现miRNA*可以作为一条功能链发挥重要作用。其中研究较多的是miR-21-3p和miR-34a-3p,而miR-21-3p和miR-34a-3p表达与胶质瘤侵袭表型的相关性还没有研究进行探索。目的:分析探讨miR-21-3p和miR-34a-3p的表达水平与胶质瘤侵袭表型的相关性。方法:利用qRT-PCR检测miR-21-3p和miR-34a-3p在胶质瘤细胞(A172、U373、SNB19)中的表达水平;然后挑选一株同时低表达miR-21-3p和miR-34a-3p 的胶质瘤细胞株,分组转染 NC mimics、miR-21-3p mimics、miR-34a-3p mimics后,再次运用qRT-PCR分别检测转染后胶质瘤细胞miR-21-3p和miR-34a-3p的表达水平,确保达到高表达水平。之后,通过CCK-8增殖试验、Transwell体外侵袭试验、划痕愈合试验分别观察NC mimics组、miR-21-3p mimics组、miR-34a-3p mimics组对胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。另外,利用Western blot 检测 NC mimics 组、miR-21-3p mimics 组、miR-34a-3p mimics 组中AG02蛋白的表达水平。结果:qRT-PCR结果提示A172细胞株中miR-21-3p的表达水平与U373、SNB19相比相对较低(p<0.001)。A172细胞株中miR-34a-3p的表达水平与U373、SNB19相比也相对更低(P<0.001),综合考虑后我们选择A172细胞株进行下一步转染实验。我们再次运用qRT-PCR检测转染后的A172细胞系中miR-21-3p/miR-34a-3p 表达水平,结果发现与 NC mimics 相比较,miR-21-3p mimics、miR-34a-3p mimics 转染组细胞中 miR-21-3p/miR-34a-3p 表达水平均明显增高(p<0.001)。CCK-8 实验结果显示 miR-21-3p mimics 组及 miR-34a-3p mimics组分别与NC mimics组比较细胞增殖活性显著增高,均有显著差异(P<0.05);表明过表达miR-21-3p、miR-34a-3p可显著增加胶质瘤细胞A172的增殖能力。Transwell侵袭实验结果显示转染miR-21-3p mimics、miR-34a-3p mimics的A172胶质瘤细胞中Transwell小室内每个视野穿膜细胞数量与NC mimics组的细胞数量均有显著差异(p<0.001),表明过表达miR-21-3p、miR-34a-3p可促进胶质瘤细胞的侵袭能力。划痕愈合实验结果提示转染miR-21-3p mimics、miR-34a-3p mimics的A172胶质瘤细胞中,细胞迁移的细胞数量与NC mimics组的细胞数量均有显著差异(p<0.001),表明miR-21-3p、miR-34a-3p的过表达可促进胶质瘤细胞的迁移能力。以上结果提示,miR-21-3p、miR-34a-3p的表达水平与A172胶质瘤细胞的增殖、侵袭、迁移能力具有正相关关系。此外,Western blot 实验结果提示 miR-21-3p mimics 组、miR-34a-3p mimics 组分别与NC mimics组比较AGO 2蛋白表达水平下调。结论:miR-21-3p、miR-34a-3p的高表达可以促进胶质瘤细胞A172的侵袭、迁移、增殖能力,提示其可能在胶质瘤浸润和转移中发挥重要作用。另外,过表达miR-21-3p、miR-34a-3p后AGO 2蛋白表达水平下调,提示miR-21-3p、miR-34a-3p可能通过与AGO 2蛋白结合,然后影响相应的靶基因mRNA从而发挥致癌作用。