白菜矮化突变体cd1生理特性及初步定位

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白菜是我国原产蔬菜,具有悠久的栽培历史,拉丁文学名为Brassica pekinensis(lour)Rupr,属十字花科芸薹属,二年生的草本植物,是中国各地广泛栽培食用的蔬菜之一。本试验以课题组已构建好的EMS诱变突变体库中的矮化突变体cd1与野生型为试验材料,通过对它的表型以及生理指标鉴定、细胞学鉴定、外源喷施激素处理、花粉活力鉴定等进行分析,然后对cd1进行初步定位、候选基因的鉴定以及表达量分析,主要研究结果如下:1、白菜矮化突变体cd1表型以及花粉活力鉴定分析表明:突变体cd1植株明显矮化,与野生型相比较,cd1生长缓慢、下胚轴极短,叶片颜色加深、有刺毛且伴有叶裂性状、叶面积变窄、叶脉突出、根的伸长明显受到抑制,侧根数目明显减少,总根数也显著降低。当突变体cd1抽薹开花时,我们发现cd1的花瓣中雄蕊明显花粉较少。醋酸洋红染色结果显示cd1中花粉活力较弱。2、生理指标鉴定结果发现:突变体cd1的叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量都比野生型要高,因为叶绿素的含量比较高,从而导致突变体cdl的光合速率、胞间CO2浓度、气孔导度也高于野生型,可以说明,颜色加深有助于光合作用,由于蒸腾速率低于野生型,说明突变体cd1对外界环境的适应能力较强。3、细胞学鉴定结果表明:观察叶片发现,细胞数目明显减少,且排列不规则。因此,推测叶片表型的不同是由于细胞数目减少和细胞不规则排列造成的。观察茎秆发现,茎秆组织的薄壁细胞和中柱细胞未能在纵向上正常伸长,这表明cd1主茎细胞分裂过程受抑制,从而导致细胞数目减少。从而影响茎秆变短。4、外源喷施赤霉素结果表明:外源施加赤霉素的矮化突变体cd1在株高上有恢复现象,其他性状比如叶片,在叶长、叶宽以及叶片起伏程度上都无明显变化。所以,矮化突变体cd1对于赤霉素外源激素处理具有一定的敏感性,并推测突变体cd1株高变矮的原因是因为激素合成缺陷导致的。5、通过对BSR-Sep的结果进行验证与分析,确定目标基因的位置。然后通过大白菜3.0数据库,利用Primer5软件展开SSR引物设计,有效选取出具备多态性的引物以及相关突变体cd1基因并完成了相应的连锁标记,从而最终定位矮化突变体cd1基因的位置在引物L06-09与L06-14之间(物理位置21621766-24683923)。6、本研究对其候选基因进行差异表达分析,最终确定两个候选基因,分别为:BrA06g034110.3C、BrA06g033010.3C,这两个候选基因将在后续精细定位中进一步验证。
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