【摘 要】
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基于稀土荧光生物探针的长寿命荧光特性而发展起来的高灵敏度时间分辨荧光生化分析技术可有效消除来自生物体样品的背景荧光干扰,已经在临床诊断与生物技术领域得到了广泛的
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基于稀土荧光生物探针的长寿命荧光特性而发展起来的高灵敏度时间分辨荧光生化分析技术可有效消除来自生物体样品的背景荧光干扰,已经在临床诊断与生物技术领域得到了广泛的应用。然而,由于稀上荧光生物标记物都存在生物亲和性的问题,一定程度上限制了其在时间分辨荧光生化分析技术领域的应用。本硕士论文研究利用将Eu(Ⅲ)、Eu(Ⅲ)/Tb(Ⅲ)(Eu:Tb=1:1)及Tb(III)与配体4’-苯基-2,2’：6”,2”-联三吡啶-6,6”-二甲胺四乙酸的荧光配合物包裹进去铁蛋白中的方法,制备出了可发出红、橙、绿系列荧光颜色的稀土配合物修饰蛋白质。这种修饰蛋白质不仅保持了去铁蛋白的外部结构,同时还保持了稀土荧光配合物的发光性质。为了验证修饰蛋白可以作为生物标记探针用于时间分辨荧光生化测定中,将包裹了稀土配合物的去铁蛋白与链霉亲和素(SA)共价键合后用于人前列腺特异抗原(PSA)的时间分辨荧光免疫测定。结果表明,SA经蛋白标记后依然保持了良好的生物反应活性,可用于人PSA的高灵敏度免疫测定。另外,包裹了稀土配合物的去铁蛋白还被成功地用于人宫颈癌细胞(HeLa cells)的时间分辨荧光成像测定。上述结果表明,包裹了稀土荧光配合物的去铁蛋白可作为一种荧光探针用于时间分辨荧光生化测定。
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