【摘 要】
：
荜拔酰胺（Piperlongumine,PL）是传统药用植物荜拔中的一种生物碱类活性提取物,近年来越来越多的研究报道PL具有的抗肿瘤、抗抑郁、抗氧化等活性,是潜在的抗癌药物。细胞自噬广泛存在于真核生物细胞内,是维持细胞内稳态的一种保守的溶酶体降解途径。自噬与肿瘤的发生发展密切相关,肿瘤细胞可以利用自噬机制抵御抗肿瘤药物诱导的凋亡,从而产生耐药性。PL具有抗肿瘤临床应用前景,然而对其诱导的自噬与肿瘤
【基金项目】
：
国家重点研发计划项目（2018YFD0400500）；
论文部分内容阅读
荜拔酰胺（Piperlongumine,PL）是传统药用植物荜拔中的一种生物碱类活性提取物,近年来越来越多的研究报道PL具有的抗肿瘤、抗抑郁、抗氧化等活性,是潜在的抗癌药物。细胞自噬广泛存在于真核生物细胞内,是维持细胞内稳态的一种保守的溶酶体降解途径。自噬与肿瘤的发生发展密切相关,肿瘤细胞可以利用自噬机制抵御抗肿瘤药物诱导的凋亡,从而产生耐药性。PL具有抗肿瘤临床应用前景,然而对其诱导的自噬与肿瘤细胞凋亡的联系报道较少。本研究通过分子细胞生物学技术方法,研究PL对肝癌细胞自噬和凋亡的影响及作用机制,旨在揭示其诱导的细胞自噬在肝癌细胞凋亡中的作用及其机制。研究结果主要包括:（1）通过Western blot检测PL对肝癌细胞Hep G2、SMMC-7721自噬标志蛋白LC3、p62水平的影响,结果显示,PL以时间依赖性方式诱导LC3-II积累;自噬抑制剂Bafilomycin A1（Baf A1）与PL共处理能够显著促进LC3-II的进一步积累,表明PL促进肝癌细胞Hep G2、SMMC-7721的自噬发生;（2）通过Western blot和稳定过表达TFEB-GFP的细胞系检测PL诱导自噬的分子机制,结果显示,PL显著促进TFEB核易位并抑制Akt和m TOR下游蛋白p70s6k的磷酸化,表明PL通过Akt/m TOR通路以及TFEB途径诱导肝癌细胞自噬;而钙离子螯合剂BAPTA-AM与PL共处理,不影响TFEB入核,表明PL诱导的TFEB激活不依赖于钙信号;（3）通过MTT、Western blot等检测PL对肝癌细胞Hep G2、SMMC-7721活力及凋亡的影响,结果显示,PL对肝癌细胞活力有明显的抑制作用,上调促凋亡蛋白Bim的表达,激活caspase-9和caspase-3,最终导致肝癌细胞凋亡;（4）通过MTT、Western blot、流式细胞术等检测抑制自噬后PL对肝癌细胞Hep G2、SMMC-7721活力及凋亡的影响,结果显示,自噬抑制剂氯喹（CQ）与PL共处理与PL单独处理相比显著增加了PL诱导的细胞活力抑制及凋亡水平,表明抑制自噬能够明显增加肝癌细胞对PL的敏感性。综上所述,PL通过Akt/m TOR通路和TFEB途径诱导自噬发生,抑制自噬显著增加肝癌细胞Hep G2、SMMC-7721对PL的敏感性。研究结果揭示了PL诱导自噬的分子机制,以及PL诱导的细胞自噬降低其对肝癌细胞凋亡的作用,为提高其抗肿瘤效果提供理论基础。
其他文献
甾体化合物,广泛存在于自然界中,在医药等领域具有重要的价值,甾体类药物是仅次于抗生素的第二大类药物。17β-羟基甾体化合物不仅本身具有重要的药用价值,也是合成多种甾体药物的重要中间体。17-羰基的选择性还原是合成17β-羟基甾体化合物的最直接的方法,但由于分子中通常含有多个羰基,化学还原存在区域选择性和立体选择性低的问题,而羰基还原酶具有高的区域选择性和立体选择性,且反应条件更温和,为获得17β-
木质纤维素具备丰富、可再生和分布广泛等特性,是一种有前途的化石资源替代品。利用木质纤维素不仅能生产许多生物基材料,其产物还可以作为石油的替代品来减少温室气体的排放。然而,木质纤维素炼制的生产经济性限制了其发展。多组分地综合利用木质纤维素,将其进行分级转化为不同的高附加值产品,能够显著提高生物炼制的经济可行性。因此,开发多级预处理工艺以实现木质纤维素的多组分利用,对提高木质纤维素生物炼制的经济可行性
急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia,ALL）是儿童和青少年时期发病率最高的儿童恶性血液系统疾病。目前临床上广泛应用鞘内注射联合全身化疗治疗,而期间伴随强烈的毒副作用以及产生耐药性,已成为治疗失败的重要因素。因此寻找天然低毒性药物,为提高ALL疗效改善预后提供有效途径。人参皂苷Rh2（ginsenoside Rh2,GRh2）是从人参中提取出最具标志性的稀有
自1993年美国学者Stierle和Strobel从短叶红豆杉的韧皮部分离到一株产紫杉醇的内生真菌后,从药用植物的内生真菌寻找具有生物活性的新天然产物成为发现新药先导化合物的重要途径,尤其是来自深海、极地、盐湖等极端环境中的菌株资源及植物内生真菌资源。本课题以蹄叶橐吾的茎中分离出来的内生真菌Diaporthe sp.T24为研究对象进行展开研究,该药用植物采摘于海拔高达4562米的极端环境。根据杜
化疗导致的神经痛是限制其应用的一大影响因素,并且目前没有一种能有效缓解化疗痛的药物。重楼是中国的传统镇痛药物,重楼皂苷（Rhizoma Paridis saponins,RPS）是其主要成分,已经证明RPS不仅有良好的抗肿瘤活性,还对化疗药有良好的增效减毒作用。前期实验还发现RPS在慢性癌痛模型中有良好的镇痛效果,其镇痛机制可能与调节小鼠脑中的氧化应激和炎症因子有关。为了探究RPS能否缓解化疗导致
流行性感冒（Influenza）简称流感（Flu）,是一种由流感病毒感染引起的急性呼吸道传染性疾病。流感病毒神经氨酸酶（Neuraminidase,NA）是抗流感药物设计的最重要靶点。NA的天然底物唾液酸（Sialic Acid,SA）与其结合活性较低,本论文拟采用“糖簇效应”（Glycoside Cluster Effect）通过制备多价酰胺唾液酸-蛋白缀合物模拟天然黏蛋白来提高SA与NA的结合
自噬-溶酶体降解途径在细胞代谢、组织和机体稳态中发挥着重要作用,是真核细胞维持内环境稳态和细胞器质量控制的主要调控途径。自噬相关蛋白ATG7是自噬发生的核心蛋白之一,它可以促进自噬相关蛋白ATG5与ATG12的结合以及LC3蛋白与磷脂酰乙醇胺的结合,从而调控自噬的发生过程。尽管ATG7在自噬发生过程中发挥着重要的作用,但与其相互作用的蛋白及对自噬功能的影响鲜有报道。本课题以Flag-ATG7过表达
高脂血症作为诱发心脑血管疾病的主要因素已经严重威胁到人类健康。研究发现一些益生菌具有调节脂代谢紊乱作用。植物乳杆菌CGMCC 8198（Lactobacillus plantarum CGMCC 8198）是本实验分离的一株益生菌菌株,前期动物水平研究已发现其具有较强的耐酸、耐胆盐及肠道粘附定植活性,并可能通过调节HMGCR（3-hydroxy-3-methylglutaryl-Co A redu
硒在自然界中的含量较低,在1817年被人类发现之后一直被认为是具有较大毒性的元素,此后的40年人们发现硒是生命体不可或缺的微量元素。现代医学证明,缺乏硒是导致人体患上克山病及大骨节病的重要原因,除此之外,硒元素在生命体中具有重要的抗氧化和抗癌作用。碲与硒是同一族元素,两者具有类似的化学性质,因此研究含硒及含碲有机化合物对人体的生命健康有着重要的意义。通常合成不对称硒化物和碲化物的方法需要使用到金属
肺癌的死亡率占据癌症的首位,而非小细胞肺癌是占比最大的一个亚型,占肺癌发病率的85%左右,因此有效治疗非小细胞肺癌可以明显降低肺癌死亡率。研究发现糖尿病会增加非小细胞肺癌的患病风险,且与肺癌的不良愈后密切相关。联合用药从多靶点、多机制出发,起到良好抑制肿瘤增长的效果,因此越来越受到青睐。本研究将二甲双胍、拓扑替康及克唑替尼联合用药,进一步探究联合用药对非小细胞肺癌的作用效果及其潜在的作用机制,也希