【摘 要】
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急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia,ALL）是儿童和青少年时期发病率最高的儿童恶性血液系统疾病。目前临床上广泛应用鞘内注射联合全身化疗治疗,而期间伴随强烈的毒副作用以及产生耐药性,已成为治疗失败的重要因素。因此寻找天然低毒性药物,为提高ALL疗效改善预后提供有效途径。人参皂苷Rh2（ginsenoside Rh2,GRh2）是从人参中提取出最具标志性的稀有
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急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia,ALL）是儿童和青少年时期发病率最高的儿童恶性血液系统疾病。目前临床上广泛应用鞘内注射联合全身化疗治疗,而期间伴随强烈的毒副作用以及产生耐药性,已成为治疗失败的重要因素。因此寻找天然低毒性药物,为提高ALL疗效改善预后提供有效途径。人参皂苷Rh2（ginsenoside Rh2,GRh2）是从人参中提取出最具标志性的稀有皂苷,具备良好的抗肿瘤药理活性且毒副作用不显著。本论文主要以GRh2为研究对象,探究GRh2在体内和体外抗急性淋巴细胞白血病的作用,并阐明其潜在抗白血病作用的分子机制。首先选用人ALL的T系Jurkat细胞、人B系Reh细胞、人正常B、T细胞行细胞培养。通过细胞活性检测法和流式细胞技术法检测结果表明了GRh2对Jurkat细胞的活性抑制效果较好,且浓度在30-60μM时呈浓度依赖性显著降低细胞存活率,并将Jurkat细胞周期阻抑在G1期,而对正常人B、T细胞的阻抑作用不显著。以Jurkat细胞为主要研究对象,采用流式检测、共聚焦显微镜和透射电镜等方法检测到GRh2促进Jurkat细胞内凋亡和自噬,Western Blot检测结果显示GRh2通过提高凋亡和自噬通路蛋白表达推动Jurkat细胞凋亡和自噬。随后通过单独使用GRh2或联合PI3K/Akt/m TOR抑制剂LY294002、GSK690693和雷帕霉素作用Jurkat细胞,通过细胞活性、流式检测以及Western Blot等方法,结果显示GRh2抑制PI3K/Akt/m TOR信号通路显著降低Jurkat细胞存活率,并将细胞周期阻抑在G1期;此外,提高凋亡和自噬通路相关蛋白表达推动细胞的凋亡和自噬进程。最后构建SCID/NOD异种移植急性淋巴细胞白血病小鼠模型,结果发现GRh2能够改善小鼠毛发暗黄无光泽、无精打采以及身躯弓背蜷缩的病理状态,有效抑制体内白血病细胞增殖,降低在小鼠骨髓中的浸润程度,发挥体内抗急性淋巴细胞白血病的作用。本研究结果表明GRh2在体外和体内对白血病细胞均有显著的阻抑作用,并GRh2抑制PI3K/Akt/m TOR信号通路发挥抗ALL作用机制,为临床ALL的治疗提供了新思路及天然药物,其成果将具备重要的理论意义和临床应用价值。
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