背景和目的目前,我国老龄化人口不仅数量多,而且发展速度快,已居世界首位。从2000年到2007年,我国60岁以上的老年人口由1.26亿增长到1.53亿,占总人口的比例从10.2%提高到11.6%,占全球老年人口的21.4%。随着人口老龄化的增长,我国脑血管病发病率日益增多,血管性痴呆(vascular dementia, VD)成为导致痴呆的第二大病因。加之本病致残率高、病程长、治疗费用高等特点,使社会和家庭负担较重,因此VD的研究对于预防痴呆发生,减少社会和家庭负担,改善患者生存质量,有重大意义。VD的具体发病机制目前尚不完全清楚,目前研究认为,VD与兴奋性氨基酸毒性、炎症反应、自由基、胆碱酯酶和细胞凋亡、线粒体功能障碍等学说有关。近十几年来研究证实内源性CO是继NO之后的又一重要气体分子,主要由血红素氧合酶(heme oxygenase,HO)催化分解血红素而产生,能减轻细胞损伤,扩张毛细血管,改善循环,广泛参与体内的生理病理过程,是一种新型的神经递质,是近几年来神经科学研究的一个新的热点问题。血红素氧合酶是内源性CO产生的关键酶,它存在着若干个亚型。20世纪80年代末有人发现了HO的一个亚型即HO-1,并证实其具有和热休克蛋白P32相同的结构,这个发现引起了人们对HO作为应激反应蛋白新的认识。近几年来随着人们对HO/CO系统的深入研究,发现HO-1能发挥抗氧化作用,对心血管、肝脏、神经系统的保护作用及机制是近几年的研究热点。但是在VD大鼠模型中,是否存在着HO-1及其变化,以及丁苯酞是否能通过影响HO-1的表达而改善学习记忆的能力,目前还未见报道。本研究通过建立血管性痴呆大鼠模型,观察HO-lmRNA表达的变化,探讨丁苯酞治疗VD的具体机制。方法本研究分为两个部分。第一部分,以清洁级SD大鼠为研究对象,采用双侧颈总动脉永久性结扎的方法制备VD模型,随机分为假手术组、模型组、丁苯酞组。造模成功2月后丁苯酞组给予丁苯酞注射液6mg/kg腹腔注射给药,每日一次,连续30天；模型组腹腔注射0.9%的生理盐水与丁苯酞注射液等剂量,连续30天；假手术组不给药。各组大鼠分别在腹腔注射结束后应用MG-2Y-型迷宫实验进行学习和记忆能力测试。学习测试：大鼠受到电击后从起步区逃至安全区的反应为正确反应,以达到连续10次中有9次均为正确反应所需的电击次数表示其学习能力。记忆测试：学习测试后大鼠休息24h,同法检测记忆能力,记录每只大鼠10次电击中的正确反应次数为记忆成绩。第二部分采用RT-PCR观察大鼠海马区HO-lmRNA表达的变化,HE染色法观察海马区细胞形态的变化,采用统计学方法,比较其差异。结果(1)Y迷宫试验：模型组大鼠的学习和记忆能力均下降,具体表现为学习达标所需电击次数最多,但是24h后的记忆的正确次数最少；假手术组学习达标所需的电击次数最少,但是记忆正确的次数最多；丁苯酞组居中。其中模型组与假手术组相比较有显著性差异(P<0.01)；丁苯酞组较模型组学习记忆能力改善(P<0.01)。(2)HE染色：假手术组海马CA1区神经元结构清晰,排列紧密,细胞结构完整；模型组海马CA1区结构紊乱,排列疏松,数目最少,细胞核固缩、深染,胞浆周围可见空晕；丁苯酞组居中,神经元数量较多,排列较紧密,细胞核圆,核仁清晰,仅见少量固缩变性的神经元。(3) RT-PCR法HO-lmRNA的表达：假手术组HO-lmRNA表达很弱；模型组与假手术组相比可见HO-lmRNA表达增强(P<0.01)；与模型组相比,丁苯酞治疗后HO-lmRNA表达明显增高(P<0.01)。2.大鼠慢性缺血可诱导脑组织HO-lmRNA快速高效的表达3.丁苯酞对VD大鼠的保护作用可能通过提高HO-1基因的表达,从而提高抗氧化酶活性、提高抗氧化应激能力、抗自由基水平等来实现。