烧伤复合内毒素致肝脏细胞凋亡实验研究

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80只大鼠随机分为正常对照(5只)和3个实验组(75只,每组25只)。烧伤复合内毒素注射组(烧注组)采用大鼠20%Ⅲ度体表凝固汽油烧伤复合腹腔注射内毒素(1mg/kg)为实验模型,单纯烧伤组(单烧组)仅造成同样面积的体表烧伤,单纯内毒素注射组(单注组)仅注射同样剂量的内毒素,各组观察时相点为伤后(注射后)1、3、6、12、24h,每时相点5只动物。应用组织学、原位末端脱氧核苷酸转移酶标记技术(TdT-mediated dUTP Nick End Labeling,TUNEL)、DNA凝胶电泳(gel electrophoresis)、免疫组织化学染色、生物化学检验技术,研究各组肝脏细胞凋亡及其规律,并初步探讨其发生机制。 主要结果及结论如下: 1.烧伤复合内毒素致肝脏细胞凋亡发生早、程度重,伤后6h、12h有大量肝细胞发生凋亡,伤后24h伴肝细胞坏死。 2.烧注组肝细胞抗凋亡蛋白Bcl-2伤后下调,而促凋亡蛋白Bax则持续上调,Bcl-2/Bax比例的下降是肝细胞发生凋亡的原因之一。 3.烧注组伤后3h代表脂质过氧化反应的血清MDA含量升高,其发生时间恰与肝脏细胞大量凋亡发生前的时相吻合,说明脂质过氧化反应与肝细胞凋亡发生有关联,肝脏MDA含量的升高则与肝细胞凋亡及坏死发生有关。 4.烧注组3h后血清NO含量持续升高,说明血清NO含量的持续升高是导致肝细胞凋亡及坏死的原因之一,肝脏NO含量的升高则是肝细胞凋亡和坏死发生的继发性结果。
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