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在该研究中对白来航鸡超数排卵、超排卵体外受精及体外培养进行了研究,为禽类转基因及核移植的研究奠定基础.1.激素诱导鸡超数排卵的研究:产蛋规律母鸡腹部皮下注射75IU或100IU的PMSG,连续注射3~8天,确定PMSG抑制产蛋的最佳剂量.结果表明:注射75IU能使33％的鸡在8天内停止产蛋;注射100IU能使96％的鸡在8天内停止产蛋,因此100IU的PMSG为适宜的注射剂量.每天注射100IU的PMSG,连续注射3~8天,直至停止产蛋的第2天,第3天下午腹膜或静脉内分别注射鸡垂体前叶提取物(CAPE)、丙酮干燥的鸡垂体前叶提取物(ACAPE)和人绒毛膜促性腺激素(hGG)检测诱导排卵的效果.结果表明:腹膜内注射100mgCAPE,可诱导鸡排出1.00±0.00个卵子;腹膜内注射200mgCAPE,可诱导鸡排出2.33±0.52个卵子;腹膜内注射300mgCAPE,可诱导鸡排出2.20±0.45个卵子,因此腹膜内注射200mgCAPE为较适宜的剂量.腹膜内注射10mgACAPE,可诱导鸡排出2.00±0.00个卵子;腹膜内注射15mgACAPE,可诱导鸡排出2.86±0.69个卵子;腹膜内注射20mg的ACAPE,可诱导排出3.00±1.22个卵子,因此腹膜内注射15mgACAPE为适宜的剂量.静脉内注射0.1、0.5、和5mg的ACAPE都没有卵子排出;静脉内注射1mgACAPE时,排出1.33±0.57个卵子;注射2mgACAPE时,排出2.67±0.57个卵子.静脉内注射500IU的hCG,排出0.33±0.57个卵子;静脉内注射750IU的hCG,排出0.33±0.57个卵子;腹膜内注射750IU及100IUhCG时没有卵子排出.注射CAPE、ACAPE及hCG后7.5h,卵子排出.2.鸡体外受精过程的环境扫描电镜(ESEM)观察:体外受精后5分钟及10分钟分别固定卵子,在ESEM下观察.体外受精后5分钟,精子位于卵黄膜的表面.精子的头部弯曲,顶体尚未进入卵子;体外受精后15分钟,可观察到多个精子同时穿入卵子的现象.穿入卵黄膜的精子处于不同时期,有的精子的大部分已进入卵子,只有一小段尾部还可见.因此15分钟为适宜的精卵体外孵育时间.3.鸡超排卵体外受精及体外培养的研究:200倍稀释的精液滴加在超排卵的胚盘上,在5％CO<,2>,41℃条件下,孵育15分钟.5％CO<,2>,41℃条件下,在含有20％液体清蛋白的DME-F12培养基中培养,可发育到32细胞期;在含20％液体清蛋白的M199培养基中可发育到8细胞期;在含28％DME-F12的液体清蛋白中可发育到囊胚期;在pH为7.4的100％浓蛋白中培养24h发育到囊胚期,转移到代用蛋壳中,继续发育至原条期;在pH为7.4的100％清蛋白中没有发育.4.PMSG对鸡卵子受精及发育能力影响的研究:超排卵和自然排出的卵子体外受精后在含20％清蛋白的DME-F12中培养24h;产蛋规律的母鸡每天皮下注射PMSG,连续注射3~8天,同时对其进行人工授精,收集种蛋孵化.结果表明:超排卵具有正常的体外受精和体外发育能力,注射PMSG鸡所产种蛋能孵化出雏.表明超排所用的PMSG对鸡卵子受精及发育能力没有明显的影响.以上结果表明:CAPE有ACAPE能诱导鸡一次排出多个卵子;注射排卵诱导激素后7.5h卵子排出;体外受精时精子与卵子的适宜作用时间是15min;超排卵体外培养后能发育到原条期;超数排卵所用的PMSG对鸡卵子的受精、发育没有明显的影响.