β-榄香烯乳体外作用于肾癌GRC-1细胞后的放射增敏作用以及其机制研究

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该试验旨在观察β-榄香烯乳在体外作用于肾癌GRC-1细胞株后的体外放射敏感作用并探讨其增敏作用的可能机理.该研究选用肾癌GRC-1细胞株进行体外培养,1.观察β-榄香烯乳对肾癌细胞GRC-1的放射增敏作用.培养GRC-1细胞,经β-榄香烯乳作用48小时后放置于6Me直线加速器下以400cGy/min的剂量率分别进行0cGy、200cGy、400cGy、600cGy、800cGy、1000cGy的剂量进行照射(照射距离为60cm),在96孔培养板中以MTT法检测其放射敏感性,在24孔培养板中以每孔50个单细胞进行单克隆培养,11天后计数每个孔中细胞克隆数目(50个细胞以上为一个克隆)并获得数据,绘制放射存活曲线.2.以流式细胞仪检测肾癌细胞GRC-1经β-榄香烯乳作用后细胞周期的改变以及细胞凋亡情况.培养GRC-1细胞,经β-榄香烯乳作用6、12、24、48小时后,分别制成单细胞悬液,95%酒精固定,经碘化丙啶(PI)染色在流式细胞仪进行细胞周期以及细胞凋亡的检测.3.观察GRC-1细胞经β-榄香烯乳作用后Bcl-2蛋白和Pcna表达的变化.以细胞爬片方式培养GRC-1细胞,经β-榄香烯乳作用48小时后以细胞免疫化学的方法对细胞爬片进行染色,并将染色结果放置于辉度仪下进行分析.
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