丙型肝炎病毒基因型与2’,5’-寡腺苷酸合成酶相关性研究

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中国是丙型肝炎病毒(HCV)的高流行区.约有3-4千万名HCV感染者.丙型肝炎(HC)的主要临床特点是极易慢性化<[1-2]>,最终约有80%感染者引起肝硬化、肝癌.因HCV的高度变异性,目前尚无有效疫苗能够预防HCV感染,也无特效治疗药物.因此对相关人群进行筛查和早期诊断是控制HCV感染的重要手段.本组实验分别对门诊体检、住院患者和血液透析患者用ELISA方法检测抗-HCV IgG,并采用RT-nested-PCR方法检测HCV RNA.三组人群中血液透析患者HCV感染率最高,抗-HCV IgG和HCV RNA分别为55.37%和38.84%.HCV基因型具有明显的地理差异,对于治疗效果、致病的严重程度及鉴定传染源、追索传播途径具有重要意义.该研究依据国际公认的Simmonds HCV基因型命名,采用HCV型特异性PCR基因分型方法,对79例HCV RNA阳性标本,分别用张建琼教授在国内首先使用的5非编码区(5-NCR)1、2、3、1b型特异性引物扩增,同时对于部分样品的PCR产物进行克隆纯化和核苷酸序列分析.结果显示:HCV基因型以1b亚型为主,1b及1b的相关型占91.67%.混合感染率20.83%.所抽取的6例HCV核苷酸序列分析显示:相互间同源性达96.5%-98.8%;并与GeneBank中的AB049088(HCV 1b亚型)非常接近,与型特异性PCR的基因分型结果完全一致,证明了该方法的可靠性.临床分析证实:此6例患者均在同一时间、相同环境下进行透析.由此推测其HCV的感染可能与医源性传播有关.2,5寡腺苷酸合成酶(2-5AS)是病毒感染期间,由IFN-α诱导的酶,它通过活化潜在的内切核糖核酸酶(RNasel),从而阻断病毒复制和抗细胞增殖.目前HC的标准治疗是用干扰素(IFN),它虽非理想的治疗HC药物,但仍然是唯一有效药物,其抗病毒作用主要与2-5AS、蛋白激酶、磷酸二酯酶等三种IFN-α诱导细胞合成的酶有关.通过检测外周血单个核细胞(PBMC)中的2-5AS水平来反映体内IFN系统的活性状况,作为合理使用IFN的指标.该实验用PEI-CELLULOSE薄板层析法检测其PBMC的2-5AS.实验结果显示:1b型和1b相关的混合感染者2-5AS活性显著升高.而其它基因型与健康对照组酶活性无明显差别.提示2-5AS活性的基础水平升高可能是HCV 1b亚型对IFN反应低下的原因之一.
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