论文部分内容阅读
第一部分空肠弯曲菌在不同培养条件下的形态学变化及VITEK-2生化鉴定目的:观察空肠弯曲菌在不同条件下的形态学变化及不同浊度和不同状态对生化反应结果的影响。方法:1将实验室保存的空肠弯曲菌菌株复苏后在不同培养条件下培养,分时间点涂片革兰染色光镜下观察其形态学变化;2将实验室保存的空肠弯曲菌菌株复苏于42℃,10%CO2、5%O2、85%N2微需氧条件下培养、传代,使用不同浊度及不同状态的空肠弯曲菌行VITEK鉴定,对比其生化反应的结果。结果:1空肠弯曲菌由微需氧环境转移至空气环境中其形态可由革兰阴性杆菌变化为革兰阴性球菌,在一定的时间内,重新传代放回微需氧环境,其形态又可恢复,在微需氧环境继续放置较长一段时间,又可变化为革兰阴性球菌;2对于同种空肠弯曲菌,其他条件相同的情况下,不同浊度及不同状态VITEk鉴定结果不同。结论:1空肠弯曲菌的形态可随着供氧状况和营养因素的变化而变化;2空肠弯曲菌的浊度和形态可影响VITEK的鉴定结果。第二部分非空肠弯曲菌所致疾病患者及GBS患者粪便中空肠弯曲菌的分离目的:探索不同人群粪便中空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,Cj)的分离方法。方法:1标本采集:常规采集非空肠弯曲菌所致疾病患者及GBS患者的新鲜粪便;2培养:加入布氏肉汤于42℃,10%CO2、5%O2、85%N2微需氧条件下培养;3传代:以24小时为一个周期,蘸取培养液接种于加抗生素的哥伦比亚血培养基中培养,以后挑取疑似单菌落传代;4鉴定:需要时进行镜检、生化试验及PCR鉴定;5阳性对照及质控:整个过程以NCTC11168菌株及Lulei菌株为阳性对照及质控菌株。结果:1少量采样(棉拭子蘸取)共采集分离非空肠弯曲菌所致疾病患者116例,未分离到空肠弯曲菌,采集GBS患者粪便2例,未分离到空肠弯曲菌;2较大量采样(采样量约为0.5cm3)共采集分离非空弯所致疾病患者粪便249例,未分离出空肠弯曲菌,采集GBS患者粪便标本6例,分离出1株空肠弯曲菌,并经形态学、生化反应及PCR鉴定为空肠弯曲菌。结论:1非空肠弯曲菌所致疾病患者粪便中未分离出空肠弯曲菌,GBS患者分离出一株空肠弯曲菌。2初步探索了粪便中空肠弯曲菌的分离方法,空肠弯曲菌可能只是作为感染源存在而不是人肠道的正常菌群;可能所用方法不适用于人粪便中空肠弯曲菌的分离。第三部分空肠弯曲菌保存数据库的初步建立目的:1初步建立细菌数据库;2使数据库符合国家标准。方法:总结空肠弯曲菌的各项特征及基本研究所需要的项目,利用计算机及Microsoft Excel软件表格,将空肠弯曲菌的各项信息输入。结果:空肠弯曲菌信息总结有基本信息、生理生化特性、耐药性、遗传学指标、共享及其他六大部分,共包含100余项信息,分成六个独立的表格,每个表格里同一株细菌有相同的编号。结论:初步建立了空肠弯曲菌的保存数据库。