蚕豆赤斑病病原菌的鉴定及抗性资源筛选

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蚕豆赤斑病(broad bean chocolate spot)是由葡萄孢属真菌(Botrytis spp.)引起的蚕豆生产中最重要的病害之一。主要由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、蚕豆葡萄孢(Botrytis fabae)、拟蚕豆葡萄孢(Botrytis fabiopsis)三种病原菌引起。在我国乃至世界地区均有发生,气候适宜时,病害发生相当严重。本研究通过形态学观察和分子生物学技术,对采自甘肃、青海、江苏、安徽、四川、湖北、河北、重庆8个省市的蚕豆病样进行分离鉴定并做产孢实验及遗传多样性分析,另外对161份蚕豆品种进行抗性资源的筛选,具体结果如下:1.2010~2011年间对8个省市采集的赤斑病标样进行单孢分离,通过形态学观察及分子生物学技术将其鉴定为3种病原菌分离物。共鉴定出314个分离物,其中灰葡萄孢分离物110个,蚕豆葡萄孢分离物84个,拟蚕豆葡萄孢分离物120个。对314个葡萄孢分离物做致病力测定,所有分离物对蚕豆品种均致病,3d后产生不同大小病斑。2.本研究采用形态学观察、Bc-hch基因序列扩增、转座子检测、酶切多态性分析技术、简单重复序列扩增多态性(SSR)技术,对8个省市的110个灰葡萄孢分离物多样性进行了分析,结果110个灰葡萄孢分离物在形态上分为菌丝、菌核、分生孢子三种类型,转座子组成方面分为vacuums和transposa两种类型,transposa型为主。在相似系数0.702时,110个分离物被划分为3个类群,说明分组结果与地理区域来源有关。3.选取灰葡萄孢、蚕豆葡萄孢、拟蚕豆葡萄孢代表分离物各50个,对其做遗传多样性分析,利用筛选的10个ISSR引物共扩增出123条扩增清晰且重复性高的条带,基因多样性指数为0.3777~0.5632,Shannon’s多样性指数为0.5740~0.9110,说明等位基因数与多样性指数的增大与各群体内样本数量增加有关。4.选取灰葡萄孢、蚕豆葡萄孢、拟蚕豆葡萄孢代表分离物做产孢实验,摸索出葡萄孢产孢的新方法,161份蚕豆品种中鉴定出31份抗性品种。
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