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目的:原发性肝癌(PHC)目前已成为我国最常发的恶性肿瘤之一。近年来研究显示PHC的侵袭转移与经IL-6/JAK2-STAT3信号通路介导的上皮-间质转化(EMT)密切相关。IL-6能通过激活STAT3，促进肿瘤细胞EMT，增强肿瘤细胞的侵袭能力。另外有文献显示，有些肿瘤疫苗不仅可以通过增强免疫应答抗肿瘤，还能诱导肿瘤细胞凋亡，使肿瘤侵袭转移的能力下降，但具体机制尚不十分明确。而我们前期的实验证实HA转hGM-CSF基因肝癌疫苗具有下调肿瘤侵袭性作用，提示其可能通过某种信号途径逆转肝癌细胞的EMT，但具体机制也尚不明确。为此本课题将通过用HA转hGM-CSF基因的HepG2肝癌疫苗处理IL-6诱导的HepG2细胞进行实验，观察转基因疫苗是否具有逆转HepG2细胞EMT的能力，并初步探讨其是否通过阻断JAK2-STAT3通路发挥这一作用，为肝癌的临床治疗提供新思路。 方法:①采用MTT实验，Western-blot及RT-PCR法分别检测HepG2细胞（阴性对照组）及IL-6处理HepG2细胞（IL-6组）的增殖能力的变化、EMT标志物E-cadherin、p-Stat3、Twist蛋白的表达及E-cadherin mRNA、Twist mRNA表达。②将GV230-hGM-CSF真核表达载体转染至HepG2细胞（重组质粒组），取体外培养重组质粒HepG2细胞，予以亚致死剂量(10 Gy)的60Co射线间断照射制备成转hGM-CSF基因的HepG2疫苗（疫苗组），并用转染空载质粒（空质粒组）和未经转染的HepG2细胞（空白对照组）作为对照，将四组细胞用含50ng/mlIL-6的培养基孵育24h;③采用Transwell实验，Western-blot和RT-PCR方法分别检测HepG2细胞的侵袭能力;EMT标志物E-cadherin、调控因子(p-Stat3、Twist)蛋白及E-cadherinmRNA、Twist mRNA的表达。 结果: 1、MTT实验显示50ng/mlIL-6处理HepG2细胞增殖速率较不予处理的HepG2细胞明显增强(P＜0.05)。 2、Western-blot结果显示与阴性对照组的HepG2细胞相比，E-cadherin蛋白的表达量在50 ng/mlIL-6处理HepG2细胞中出现下降，而p-Stat3、Twist蛋白则表达升高(P＜0.05)。 3、RT-PCR实验结果显示与阴性对照组的HepG2细胞相比，E-cadherinmRNA表达量在50ng/ml IL-6处理HepG2细胞中出现下调，而TwistmRNA的表达量出现上调（P＜0.05）。 4、Transwell实验结果显示用HA转hGM-CSF基因的HepG2疫苗组的穿膜细胞数为(61.4±3.6)个，分别与其它三组[质粒转染组(83.6±6.0)个、空质粒组(169.4±5.2)个、空白对照组(171.4±5.6)]相比较明显减少(P＜0.05)。 5、Western-blot结果显示用HA转hGM-CSF基因的HepG2疫苗组的E-cadherin蛋白表达量分别与其它三组（质粒转染组、空质粒组、空白对照组）相比较升高，而p-Stat3、Twist蛋白表达量与之比较有所下降(P＜0.05)。 6、RT-PCR实验结果显示与用HA转hGM-CSF基因的HepG2疫苗组的E-cadherin mRNA表达分别与其它三组（质粒转染组、空质粒组、空白对照组）相比较升高，而Twist mRNA表达量与之比较有所下调(P＜0.05)。 结论: 1、IL-6能诱导HepG2细胞EMT; 2、HA转hGM-CSF基因HepG2疫苗可逆转体外IL-6诱导的HepG2细胞EMT，使肿瘤增殖、侵袭能力明显下降; 3、HA转hGM-CSF基因HepG2疫苗可以下调转录因子Twist及Stat3的表达，上调E-cadherin的表达，从而抑制肝癌EMT，上述研究结果对肝癌疫苗的抗肿瘤作用提供一定的实验依据。