鸡Myoz3基因对屠宰性状、细胞增殖的影响及其分子机制研究

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不同类型的肌纤维在颜色、收缩性能以及代谢方式等方面存在着巨大的差异。在现代肉鸡、蛋鸡产业中,肌纤维类型的组成对经济效益有非常大的影响,因为肌纤维类型对肉品质以及代谢效率都有重要的调控作用。Myozenin3(Myoz3)是影响肌纤维分化的关键候选基因,自从发现以来就成了研究肌纤维分化的重要研究对象,因为Myoz3可以和肌纤维Z轴上多个蛋白相互作用,而Z轴在肌肉结构,信号转导等多个方面都发挥着重要的作用。因此,本研究通过分析其在鸡各个器官中的组织表达谱,分析Myoz3编码区SNP与主要生产性状之间的相关性,利用二代测序技术研究了在细胞中Myoz3表达量改变所带来的转录组水平的基因表达量改变,以此来构建Myoz3所调控的基因网络。主要结果如下:(1)鸡Myoz3在胚胎期以及出壳后均有表达,其中在腿肌,胸肌中的表达量最高,在心脏以及肝脏中的表达量较低。从胚胎期到胚胎后期呈上升趋势。Myoz3的表达量在出壳后的第一天达到峰值,并且和鸡的性别相关,然而在不同品种中并没有差异。(2)通过SNP检测及140个个体的性状相关分析结果表明,在矮脚黄鸡以及艾维因鸡群体中,总共发现了5个编码区SNP,c.240C>T、c.501C>T、c.516C>T、c.576C>T以及c.675C>G。其中在艾维因群体中总共有3个SNP,矮脚黄鸡中发现了5个SNP。所有发现的SNP都是非编码SNP。在矮脚黄鸡群体中,发现SNP c.516C>T和胸肌的亮度相关,单倍型H3和翅重率显著相关,单倍型H4和胫骨长度显著相关,双倍型H1H3和股骨围显著相关。而在艾维因群体重,所有SNP均不和生产性状显著相关。(3)利用Myoz3基因敲除技术,对心肌收缩、ECM-受体互作、PPAR、平滑肌收缩、细胞吸附在内的通路被差异基因富集的情况进行研究。结果发现,富集的功能关键词包括了钙离子,肌肉蛋白等等。富集的生物学过程包括了间质细胞迁移,筋腱发育,长链脂肪酸转运等等。在Myoz3过表达条件下,富集的生物学过程包括:促进平滑肌增殖、Henla发育环、能量代谢稳定。富集的通路总共有4条,包括了F Erb B信号通路,、流感A、单纯疱疹病毒感染、细胞吸附等等。(4)通过PPI的构建,在Myoz3过表达条件下,MYH10可以直接与MYLK2、MYLK2、GATA6、SMC4等基因直接作用,并随后形成其他二级调控网络。当在CEFs中以及成肌细胞中过表达Myoz3的时候,细胞增殖率显著提高了,然而抑制Myoz3的表达则对细胞增殖效率没有显著影响。本研究中鉴定出的SNP位点可以作为分子辅助育种技术的候选标记位点。本研究研究同时首次发现了Myoz3基因对成纤维细胞增殖发育的影响,以及其相关通路,为研究鸡胚胎发育提供了重要的理论依据。
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