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目的:针对肝部疾病共同病理基础的肝脏炎症,基于经典NF-κB炎症通路,采用核糖核酸干扰（RNAi）治疗策略,设计针对NF-κB通路中核转录因子RelA/p65蛋白的小干扰核糖核酸（p65 siRNA）;在传统脂质纳米颗粒配方基础上,对脂质纳米颗粒配方利用天然中药单体化合物甘草酸、多烯磷脂酰胆碱等进行掺杂、融合与改性,建立甘草酸改性脂质纳米颗粒递送系统,用以共递送甘草酸和p65 siRNA,这种基于配方改性-共递送的联合转运策略,有望提高递送系统的递送效率、降低递送系统的细胞毒性,增强p65 siRNA沉默目的基因、干扰其下游促炎因子表达的治疗效果,发挥甘草酸、烯磷脂酰胆碱固有的抗炎、抗病毒、抗氧化等协同保肝护肝的治疗作用,用以减轻肝部炎症造成的肝损伤。方法:首先以薄膜分散法在脂质纳米颗粒配方中掺杂、融合甘草酸、多烯磷脂酰胆碱等中药单体化合物,建立甘草酸改性脂质纳米颗粒（mLNP）核酸药物递送系统,通过对脂质纳米颗粒的理化性质、核酸包载能力、血清稳定性、细胞毒性、转染效率等进行表征,优化配方和制备工艺。利用所建立的递送系统在NCTC1469细胞上转染p65 siRNA,采用蛋白印迹法（Western blot）和定量聚合酶链式反应（q-PCR）法以及细胞免疫荧光检测（IF）考察该递送系统对目的基因的沉默效率以及对p65基因下游细胞因子,特别是炎症因子和炎症介质的干扰效果。建立脂多糖（LPS）诱导C57BL/6J小鼠急性肝损伤和肝部炎症模型,通过静脉注射给药,经甘草酸改性脂质纳米颗粒联合转运甘草酸和p65 siRNA后,Western blot法考察该治疗方案对小鼠肝组织中p65蛋白表达的抑制效率,酶联免疫吸附检测（ELISA）对p65基因下游细胞因子,特别是炎症因子和炎症介质的干扰效果,生化检测考察小鼠肝组织氧化应激、肝酶活性水平,苏木精-伊红染色（HE染色）法对小鼠肝组织切片进行病理评价。此外,经甘草酸改性脂质纳米颗粒在HepG2.CW细胞转染针对乙型肝炎病毒（HBV）的siRNA和反义核苷酸（ASO）,检测细胞上清液中乙肝病毒表面抗原（HBsAg）和乙肝病毒e抗原（HBeAg）的表达水平,评价该递送策略的抗病毒效果。结果:以在HeLa细胞转染EGFP mRNA或者FAM标记siRNA的转染效率为评价指标,对mLNP的配方、制备工艺和转染条件进行优化,确定甘草酸改性脂质纳米粒最佳配方（0.4GA/PPC LNP）具有更高的转染效率。0.4GA/PPCLNP具有球形形貌,其在粒径分布、甘草酸的包封率和Zeta电位等方面具有良好的理化特性,其对siRNA的包载能力强、血清稳定性高、细胞毒性低、细胞摄取率和转染效率高,具有良好的生物学特性。由于大多数中药单体化合物具有较差的水溶性,因此利用脂质纳米颗粒共递送脂溶性中药化合物和具有相同作用的核酸药物被证实可以成为一种提高核酸药物治疗效果的方法。在确保所设计p65 siRNA具有高效的沉默目的基因作用的基础上证明0.4GA/PPC LNP递送体系具有高效递送效率。建立了 LPS诱导NCTC1469细胞炎症模型,并利用甘草酸改性脂质纳米颗粒在细胞转染p65 siRNA,q-PCR检测结果显示,0.4GA/PPC LNP转染组对p65蛋白调控的下游炎症因子和炎症介质,如IL-1β,IL-6,COX-2,iNOS等在mRNA转录水平具有显著的抑制作用;细胞免疫荧光检测显示,0.4GA/PPCLNP转染组对p65蛋白调控的下游炎症介质,如COX-2,iNOS等在蛋白表达水平也具有显著的抑制作用。此外,经甘草酸改性脂质纳米颗粒在HepG2.CW细胞上转染抗HBV的siRNA或ASO,结果显示,由于甘草酸在配方中的掺入,递送载体本身就显示了较强的抗HBV效果,递送siRNA或ASO后,显示出强大的抗乙型肝炎病毒功能。以上结果在细胞水平阐释证明甘草酸改性脂质纳米颗粒递送p65 siRNA用以减轻肝部炎症的治疗策略具有可行性。通过对C57BL/6J小鼠腹腔注射LPS,成功建立LPS诱导小鼠肝部炎症模型,通过对小鼠静脉注射给药的方式,分别单独递送p65 siRNA,单独递送甘草酸和以0.4GA/PPC LNP介导共递送p65 siRNA和甘草酸,通过对各组小鼠进行与氧化应激相关的小鼠肝组织丙二醛（MDA）含量、总超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和髓过氧化物酶（MPO）活性进行检测;对小鼠血浆或肝组织中IL-1β、IL-6、COX-2和iNOS等细胞因子的蛋白表达水平进行检测;同时对小鼠ALT、AST肝酶活性进行测定,并对肝组织进行病理分析和病理评分。结果发现,以0.4GA/PPC LNP介导共递送甘草酸和p65 siRNA的治疗方案显著降低小鼠肝组织氧化应激水平、显著抑制LPS诱导的IL-1β、IL-6、COX-2和iNOS等细胞因子蛋白的过度表达、显著降低ALT、AST肝酶活性、显著减轻LPS诱导肝部炎症和急性肝损伤。结论:利用甘草酸改性脂质纳米颗粒递送系统联合转运甘草酸和p65 siRNA的治疗策略可有效发挥甘草酸和p65 siRNA协同抗炎、抗氧化应激作用,有效减轻肝部炎症引发的肝损伤。