【摘 要】
：
背景:胰腺癌（Pancreatic cancer,PC）作为恶性程度极高的肿瘤,预后很差,5年生存率仅为7.2%左右。有超过70%的胰腺癌患者患有恶病质,恶病质的发展最终导致对放疗和化疗的耐受性下降,并降低了总体生存率。因此,改善恶病质是提高胰腺癌患者整体生存率的关键。恶病质,定义为体重减轻和肌肉萎缩,是一种复杂的代谢综合症,超过50%的癌症患者具有恶病质表现。据估计恶病质占所有癌症患者直接死亡原
论文部分内容阅读
背景:胰腺癌（Pancreatic cancer,PC）作为恶性程度极高的肿瘤,预后很差,5年生存率仅为7.2%左右。有超过70%的胰腺癌患者患有恶病质,恶病质的发展最终导致对放疗和化疗的耐受性下降,并降低了总体生存率。因此,改善恶病质是提高胰腺癌患者整体生存率的关键。恶病质,定义为体重减轻和肌肉萎缩,是一种复杂的代谢综合症,超过50%的癌症患者具有恶病质表现。据估计恶病质占所有癌症患者直接死亡原因的约20%。有研究显示在体重减轻30%的肺癌患者的骨矿物质含量显着降低,表明恶病质与骨丢失有关。在肺癌,胰腺癌和结肠癌的临床前动物模型中显示出相似的结果。通过干预,可以减少胰腺癌增加的代谢基础,并可以通过病因学治疗减轻恶病质,从而延长化疗时间。但是,癌性相关的骨量减少的机理尚不清楚。胰腺癌细胞的外泌体在肿瘤进展,转移和化学耐药中起重要作用,并引起癌旁β细胞功能障碍,脂肪组织脂解和骨骼肌细胞胰岛素抵抗。外泌体由多种细胞类型和癌细胞分泌,并装有各种功能性生物分子（包括DNA,m RNA,非编码RNA（nc RNA）,蛋白质和生物活性脂质）。这些由外泌体转移到受体细胞的生物活性成分在细胞间通讯中起着至关重要的作用。Micro RNA（mi RNA）是约22个核苷酸的单链内源非编码RNA,靶向RNA并调节转录后基因的表达,参与许多生物学过程,例如细胞增殖,分化和凋亡。外泌体可以保护mi RNA免受RNA酶的降解,并将mi RNA转运至受体细胞。有研究表明,外泌体mi RNA在代谢性疾病中起重要作用,其失调在癌症的发展和进程中起着至关重要的作用,它们可以根据特定情况下所调控的靶点而起抑癌或癌基因的作用。然而,人们对mi RNA在胰腺癌相关骨丢失中的作用了解甚少。因此,本研究旨在探讨胰腺癌源的外泌体是否参与恶病质的骨丢失,并着重于此过程中外泌体mi RNA的生物学功能以阐明其潜在机制。同时,我们将为发现纠正胰腺癌恶病质的潜在目标做出贡献,并在胰腺癌的背景下改善诊断和治疗。方法:使用超速离心法从Kras LSL-G12D/+,Trp53LSL-R172H/+,Pdx1-Cre小鼠来源的胰腺癌细胞（KPC cells）培养上清中提取外泌体（KPC-exosomes）,以小鼠胰腺导管上皮细胞来源的外泌体作为对照（MPDC-exosomes）,处理小鼠巨噬细胞系细胞（RAW264.7）,检测破骨细胞分化及相关关键蛋白的表达情况,以验证胰腺癌细胞外泌体是否具有诱导破骨细胞分化能力。通过mi RNA基因芯片技术,我们了检测KPC-exosomes和MPDC-exosomes中mi RNAs的差异性表达,并利用KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genesand Genomes）信号通路富集分析Osteoclast differentiation相关信号通路,筛选差异性mi RNAs。利用mi RNA-mimics处理RAW264.7细胞,检测破骨细胞相关关键蛋白和m RNA的表达,对表达差异显著的若干mi RNAs进行初步的功能验证,利用双荧光素酶报告实验和回复实验,分析确定mi RNA和靶向基因的相互作用。结果:在本研究中,我们发现KPC细胞的外泌体（KPC-exosomes）在体外能诱导巨噬细胞系RAW264.7细胞分化为破骨细胞,并增加相应的标志蛋白的表达:NFAT2,TRAP,CTSK和MMP-9。在骨质疏松症模型中,骨体积分数和小梁厚度明显降低。芯片和KEGG分析表明,该过程至少部分受mi R-125a-5p/TNFRSF1B信号通路的控制。我们也通过RT-PCR和双荧光素酶报告实验验证了mi R-125a-5p和TNFRSF1B基因的关系,结果显示mi R-125a-5p通过与TNFRSF1B的3’-UTR结合而对TNFRSF1B的表达产生抑制作用。通过回复实验验证mi R-125a-5p通过靶向TNFRSF1B促进破骨细胞分化。结论:我们已经证明胰腺癌源的外泌体可以诱导破骨细胞分化,并且该过程受mi R-125a-5p/TNFRSF1B信号通路的控制。当前的研究为胰腺细胞源的外泌体对骨骼退化的作用机理提供了新的见解,并将有助于对PC与全身代谢之间关系的全面理解。随后的研究将探索有前途的外泌体mi RNA的潜力,包括功能验证和机制阐明。这项研究为改善胰腺癌恶病质的潜在目标提供了方向。
其他文献
研究背景:动脉粥样硬化是一种全身性的炎症疾病,它会导致血管局部的慢性难消融性炎症反应和动脉粥样硬化斑块的形成。最近报道的CANTOS临床试验首次肯定了靶向干预固有免疫反应对人动脉粥样硬化的效果,尽管目前它的疗效并不高。然而,目前领域内对于靶向干预适应性T细胞免疫对疾病的转归是否有效仍然非常矛盾。另外,我们仍然对斑块特异性免疫组成、其具体功能学作用和T细胞动力学、T细胞受体（TCR）以及斑块中T细胞
背景急性髓系白血病（Acute myeloid leukemia,AML）是起源于骨髓中造血干细胞与前体细胞的恶性克隆性肿瘤,也是成人最常见的血液系统恶性肿瘤,其进展快,预后差,5年生存率仅20%左右。随着科学的发展和临床数据的累积,目前已有一些针对AML常见突变位点的靶向药,如FLT3-ITD抑制剂、IDH1抑制剂、IDH2抑制剂等。然而AML具有高度异质性,目前的预后评估系统仍需完善,新的分子
急性移植物抗宿主病（acute graft-versus-host disease,a GVHD）是异基因造血干细胞移植（allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT）后的主要并发症和死亡原因之一。肠道作为主要靶器官之一,累及率高,治疗效果差,预处理阶段对胃肠道屏障的损伤引起炎性“细胞因子风暴”在a GVHD的发生发展中起
背景与目的原发性肝癌是危害人类健康的常见恶性肿瘤之一,具有较高的发病率和死亡率。慢性乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染是导致肝癌的主要危险因素。由于缺乏有效的早期诊断分子,许多患者一经发现便已是中晚期,缺乏有效的治疗手段,预后极差。因此,寻找有效的肝癌诊断分子标志物和治疗分子靶点,是亟需解决的医学难题,可以提高肝癌患者临床预后。真核翻译起始因子4γ2（EIF4G2）,是真核翻译起始因子家族（EIFs）
心血管疾病（cardiovascular disease,CVD）仍然是全球范围内主要的死亡原因。当血管的一部分由于疾病,损坏或老化而失去功能时,需要进行血管移植。由于异体器官的强烈排斥力和极少的来源,人造血管已成为一种选择。正常血管壁由三层组成:由内皮层组成的内膜,起到抗凝血的作用;主要由平滑肌细胞组成的中膜,起到血管舒缩张力和顺应性的作用,以及由疏松结缔组织组成的外膜。这种多层结构使血管具有了
背景:衰老是几乎所有生物都要经历不可避免的生命过程。近年来,随着生活水平的提高和医疗服务的进步,人均寿命得到明显的延长。世界卫生组织预计在2050年60岁以上老年人口的比例将会超过20%。衰老会引起人体全身生理功能减退,并导致基因组不稳定、线粒体功能障碍和认知功能下降等变化。因此,衰老成为肿瘤、炎症和神经退行性疾病的重要危险因素之一。其中,中枢神经系统（central nervous system
鲍曼不动杆菌是医院相关感染中的一种重要革兰氏阴性病原体。然而,由于其多重耐药性,临床鲍曼不动杆菌感染的治疗选择十分受限。另外,通常与细菌荚膜多糖相关的细菌毒性也是另一个挑战。编码鲍曼不动杆菌中的荚膜合成和转运的基因位于K基因簇,其中许多基因在鲍曼不动杆菌包膜形成中是必不可少的。然而,K基因簇中的许多基因的作用以及它们的上游调节元件尚不清楚,而这些很有可能成为开发新型抗菌药物的靶标。本研究旨在阐明位
背景与目的:乳腺癌的发病率和死亡率在全球女性的恶性肿瘤中均位列第一,其中约70%的乳腺癌患者呈雌激素受体（ER）阳性。内分泌治疗是抑制ER+乳腺癌的重要手段,但许多患者在治疗过程中会逐渐形成对内分泌治疗的耐受性,导致肿瘤转移和进展,且转移病灶对内分泌治疗的敏感性低。而联合使用化疗可以有效降低ER+乳腺癌的复发和早期转移风险,因此,化疗对于耐受内分泌治疗和发生转移的ER+乳腺癌患者同样具有重要的临床
第一章二甲双胍对PS19小鼠脑内tau病理传播的影响及其机制研究研究背景神经纤维缠结（Neurofibrillary tangles,NFTs）的沉积是阿尔茨海默症（Alzheimer’s Disease,AD）以及tau病的主要病理特征。NFTs由过度磷酸化的tau蛋白聚集形成。大量证据表明tau蛋白存在类似朊病毒样的传播,tau聚集体可以把单体tau招募到tau纤维聚集体中,并扩散到其他大脑区
研究背景:阿尔茨海默病（AD）是目前最常见的痴呆类型,临床上主要表现为进行性的认知功能下降,其中以记忆功能损伤为主。随着人口老龄化加剧,AD已经给整个社会带来巨大的养护和经济负担。由于AD病程漫长且发病机制复杂,因此目前尚无针对AD的有效治疗方法,这一窘境给AD的临床诊疗及研究带来了巨大的挑战。因此,基于精准的病程分级,结合多种发病机制,观测AD的发生发展规律,能有效揭示AD的发病机制,为临床诊疗