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石格菜为十字花科碎米荠属植物唐古碎米荠Cardamine tangutorum O.E.Schulz的全草,是藏羌等民族医临床常用药物,具有散瘀通络、祛湿、止血之功效,用于治疗跌打损伤,风湿和关节痛,黄水疮,外伤性出血,脾虚,水肿,白带崩漏以及尿血等。石格菜具有悠久的食用历史,其嫩苗在我国西南地区常作为野菜食用,现市场上有干品、酸菜等产品,具有较好的开发前景。课题组前期在四川省科技计划项目“藏羌药食两用植物石格菜质量控制研究”(项目编号:2018JY0342)的支持下,开展了石格菜生药学研究。在研究过程中发现,唐古碎米荠同属植物大叶碎米荠C.macrophylla Willd无论是藏羌民族医临床应用,还是民间食用常作为石格菜另一基原使用,但其是否可作为石格菜入药或食用,国内外尚未见相关研究报道。同时,石格菜的常用药用部位为全草,对石格菜的研究也主要集中在全草,而藏医临床有分部位使用的习惯,而目前石格菜不同药用部位的研究较少。本文对大叶碎米荠和唐古碎米荠进行系统对比研究,拟从典籍考证、原植物鉴别、性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别、化学成分研究、指纹图谱研究、无机元素分析等方面。通过不同指标综合评价,探讨大叶碎米荠和唐古碎米荠的异同,同时比较不同药用部位化学成分差异,以期为石格菜基原植物的确定提供理论依据,为后续石格菜资源全产业链开发提供科学、有效的数据支撑,研究结果如下:1.通过文献调研及实地走访调查,发现石格菜可药用、食用、饲料及观赏等,除了鲜食和入药以外,民族民间常制成干品、速冻或酸菜等不同工艺产品(特产),是能够带动人工种植业、加工业、销售业等全产业链开发前景的药食两用植物种。唐古碎米荠C.tangutorum O.E.Schulz与大叶碎米荠C.macrophylla Willd,二者功效以及分布区基本相同,但不同药用部位存在差异。2.采用原植物鉴别、性状鉴别、显微鉴别和薄层色谱鉴别对大叶碎米荠和唐古碎米荠开展了鉴别研究,试验结果表明:1)大叶碎米荠与唐古碎米荠可根据根状茎和茎的形态、茎生叶和小叶的不同、花颜色的不同来做区分;2)性状特征和粉末特征无明显区别;3)薄层色谱显示:大叶碎米荠与唐古碎米荠药材供试品薄层色谱中,地上部分与对照品槲皮素对应的位置上都显相同颜色斑点;地下部分与对照品β-谷甾醇对应的位置上都显相同颜色斑点。3.采用UV法优化石格菜多糖的提取工艺,分别通过单因素试验考察提取时间、料液比及提取温度对石格菜地上部分多糖和地下部分多糖得率的影响,并采用Box-Behnken试验设计优化总多糖提取工艺,试验结果表明:石格菜地上部分多糖最佳提取工艺条件为:料液比140 m L?g-1,提取时间200 min,提取温度100℃,石格菜地上部分多糖最高提取率达116.7 mg?g-1;石格菜地下部分总多糖最佳提取工艺条件为:料液比140 m L?g-1,提取时间180 min,提取温度100℃,石格菜地下部分多糖最高提取率达187.1 mg?g-1。在优化的最佳提取工艺的基础上,对地上部分和地下部分总多糖进行纯化;对石格菜中多糖、总黄酮(根据课题前期筛选提取工艺方法)含量进行了测定。地上样品中纯化后多糖含量为5.71%~11.61%,总黄酮含量为2.42%~8.11%;地下样品中纯化后多糖含量为3.40%~8.75%,总黄酮含量为0.38%~1.07%。4.化学成分研究:从唐古碎米荠地下部分分离得到9个化合物,分别鉴定为:β-谷甾醇(1)、2,2′-氧代双(1,4-二叔丁苯)(2)、3-indolcarbaldehyde(3)、对羟基苯甲醛(4)、吲哚-3-乙腈(5)、4-甲氧基吲哚-3-乙腈(6)、吲哚-3-甲酸甲酯(7)、芦丁氨酸rutalexin(8)、蔗糖(9),所有化合物均为首次从该植物中分离得到。5.根据中国药典方法、紫外分光光度法和HPLC法,对石格菜地上部分和地下部分样品进行检查项和含量测定项的研究,采用变异分析、主成分分析、聚类分析、聚类热图分析等多种统计方法联合运用对结果进行分析,石格菜地上部分样品中水分含量为6.15%~10.81%;总灰分含量为5.01%~17.91%;酸不溶性灰分含量为0.29%~7.00%;浸出物含量为12.82%~37.37%;石格菜地下部分样品中水分含量为7.36%~9.96%;总灰分含量为5.01%~15.00%;酸不溶性灰分含量为1.16%~9.00%,浸出物含量为13.80%~35.65%。基于多元统计分析,大叶碎米荠和唐古碎米荠的化学成分含量差异不明显,但是植物种内的地上部分和地下部分含量差异显著。6.采用红外光谱技术、UPLC法测定石格菜地上部分和地下部分样品,运用共有峰率和变异峰率双指标序列分析法、相似度分析、聚类热图分析对测定结果进行分析,试验结果表明:石格菜地上部分共有峰率在38.5%~100%之间,变异率在0~120%之间;加工品共有峰率在46.2%~100%之间,变异率在0~83.3%之间。石格菜地下部分共有峰率在50%~100%之间,变异率0~71.4%之间;石格菜的超高效液相色谱标定地上部分8个共有特征峰、地下部分8个共有峰,富集纯化后总黄酮5个共有峰,地下部分的超高效液相指纹图谱与对照谱图的相似度大于地上部分的相似度;聚类分析结果显示大叶碎米荠和唐古碎米荠之间、不同工艺样品之间化学成分区分不明显。7.采用ICP-MS法测定石格菜地上部分和地下部分样品中29种无机元素,通过相关性分析、主成分分析、聚类分析方法对测定结果进行分析。试验结果表明:元素间具有显著的相关性。通过主成分分析石格菜地上部分的特征元素确定为Be、Co、Fe、Mg、Se和V;地下部分特征元素为Cs、Fe、Ga和Rb。聚类分析对不同加工品结果较好分类;大叶碎米荠和唐古碎米荠无明显区分,从化学成分的角度可同等入药和食用。8.采用小鼠胃排空和肠推进运动实验法,研究石格菜糖类提取物对肠胃运动功能的影响,试验结果表明:石格菜地上部分多糖、石格菜地下部分多糖和石格菜蔗糖对小鼠小肠运动及胃排空均未表现出促进作用;对小鼠小肠推进运动和胃排空有不同程度的抑制作用,其中地上部分多糖高剂量(4.8 mg?kg-1组)的抑制作用明显,地下部分多糖低剂量(1.1 mg?kg-1组)的抑制作用明显,且对小鼠小肠推进运动及胃排空作用与模型组几乎一致,另一组剂量的抑制作用比模型组还要好,说明石格菜中不同部位、不同剂量的多糖可以减少胃肠道蠕动,对肠道的收缩有抑制作用。