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杂交育种作为目前养殖行业内最常用的育种方法之一,已成为培育具有优良特性的新品种的主要途径。通过杂交,可以获得具有双亲遗传性状以及超亲优势的杂交后代,培育出优良新品种。黑足鲍分布于新西兰南北半岛,成体平均壳长在16-18cm,最适生长温度为13-17℃,具有种质优良,抗逆性强,适应中国近海水文开展大规模底播增殖的潜力。本论文研究了杂交鲍(皱纹盘鲍(?)×黑足鲍8)(下称杂交鲍)在11、15、19、24℃4个恒温处理组以及11±2℃、15±2℃,19±2℃,24±2±2℃C4个变温处理下杂交鲍的存活率、体重日增长率、壳长日增长率、耗氧率、排氨率及荧光定量PCR方法分析HSP70表达,以期为杂交鲍在中国近海开展大规模增养殖提供基础数据。主要结果如下:1、温度对杂交鲍生长、代谢及HSP70表达的影响温度对杂交鲍存活率、体重日增长率、壳长日增长率、耗氧率、排氨率及HSP70表达均存在显著影响(P<0.05)。40d实验周期内,杂交鲍在19℃存活率最高(超过77%),在11-19℃范围内,杂交鲍的壳长日增长率、体重日增长率、耗氧率、排氨率随水温升高而增大,在19℃达到最大值,在19-24℃范围内随水温升高逐渐降低,呈现出一个随温度增长,先升高后降低的趋势,说明杂交鲍同多数水生动物一样,存在一个最适生长温度,即19℃左右,其生长和代谢情况在适温范围内随温度升高呈现先升高后降低到趋势,杂交鲍在19℃左右存在生物生长和代谢的转变点。根据杂交鲍HSP70和』Actin mRNA序列,设计合成引物,建立杂交鲍HSP70的荧光定量PCR技术平台,并检测杂交鲍在热激处理后不同恢复时间HSP70的转录水平变化。结果表明:杂交鲍HSP70表达量具有时间依赖性,在经过热诱导后的72h内,其相对表达量呈现出先升高,再降低,约72h后逐渐恢复正常水平的趋势。升高相同水温(30℃)应激处理时,养殖水温越低温差越大,HSP70上调表达越显著(P<0.05),表明杂交鲍能够在第一时间内通过对HSP70表达量的提高来适应外界环境刺激,且其应激上调表达水平与环境(温度)刺激正相关。2、温度波动对杂交鲍生长、代谢及HSP70表达的影响11±2℃、15±℃、19±2℃和24±2℃杂交鲍体重日增长率、壳长日增长率及HSP70表达均存在显著差异(P<0.05),存活率、耗氧率、排氨率受温度波动影响差异不显著(P>0.05)。在45d的养殖时间里,11±2℃、15±2℃、19±2℃和24±2℃,4个变温实验组,杂交鲍的存活率均高于85%,其中11±2±2℃C实验组的体重日增长率显著低于其他三个实验组;24±2℃和15±2℃两个实验组的壳长日增长率显著高于19±:2℃和11±2℃,而各实验组的耗氧率和排氨率之间不存在显著性差异,说明在高于或低于其最适恒温生长温度的变温环境中,杂交鲍的代谢率差异不大,但机体通过代谢获得的能量更多的用以促进杂交鲍的生长,尤其是促进了杂交鲍的壳长和体重增长。通过荧光定量PCR技术,监测杂交鲍在变温养殖环境中不同时间段HSP70的转录水平变化,结果表明,杂交鲍的肌肉组织HSP70的表达具有较强的时间依赖性,即HSP70其相对表达量随养殖时间延长呈现出逐渐降低的趋势。表明杂交鲍在初期为适应变温环境而显著上调HSP70表达量,以维持机体细胞内环境稳态和酶活性。随着时间延续,机体逐渐适应变温的环境后,HSP70表达量降低,恢复到正常水平。说明杂交鲍能够通过及时调节HSP70表达来使机体尽快适应外界环境,维护细胞内环境稳态,具有良好的环境适应性。3、温度恒定及波动对杂交鲍壳长日增长率、体重日增长率、耗氧率以及排氨率影响的比较将恒温条件下的杂交鲍生长、代谢情况与相应的变温条件进行对比,结果表明,变温处理下的杂交鲍的壳长增长率显著(P<0.05)高于恒温环境,而体重增长率显著(P<0.05)低于恒温环境,同时对比相同条件下杂交鲍的耗氧率和排氨率发现,变温环境下的杂交鲍耗氧率和排氨率与恒温环境之间不存在显著性差异(P>0.05),说明杂交鲍在变温和恒温环境中机体的代谢率不会发生显著的变化,但是变温环境中的杂交鲍会改变机体的能量收支情况,将更多的能量投入到促进机体生长尤其是壳长增长方面,而恒温环境中的杂交鲍会将更多能量投入到促进机体体重增长方面。