【摘 要】
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前言 胃癌是我国人群中发病率和死亡率均占第一位的恶性肿瘤,所以阐明胃癌的发病机理并进行有效的诊断和治疗就显得尤为重要。胃癌的发生是一个多基因多因素参与的过程,涉
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前言 胃癌是我国人群中发病率和死亡率均占第一位的恶性肿瘤,所以阐明胃癌的发病机理并进行有效的诊断和治疗就显得尤为重要。胃癌的发生是一个多基因多因素参与的过程,涉及多个抑癌基因的失活和原癌基因的异常高表达。而很多时候原癌基因与抑癌基因在重组热点或染色体脆性位点附近连锁。位于17号染色体原癌基因重组热点17q12的PPP1R1B-ERBB2-GRB7扩增子在胃癌及乳腺癌中扩增频繁,而此处同时也是17号染色体的脆性位点,提示附近可能有抑癌基因与其连锁。最近日本学者新发现的gasdermin(GSDM)基因其相关基因gasdermin-like(GSDML)定位于进化重组热点17q21,正好在此脆性位点附近与原癌基因重组热点17q12顺次相连并紧密连锁。同时发现小鼠的GSDM基因主要在食管和胃中特异表达,人的GSDM基因只在胃中特异性表达,而两者在胃癌细胞中表达均严重抑制,以上的这些信息都提示GSDM,GSDML基因有可能是抑癌基因。而其中的GSDML基因很有可能是由GSDM进化重组而来。 为了验证这一推测,本研究拟克隆GSDML基因cDNA,构建pEGFP-C3-GSDML,pIRES-GSDML,pFLAG-CMV-2-GSDML三个真核表达载体,通过绿色荧光蛋白示踪的方法对其进行亚细胞定位,并研究GSDML高表达对细胞增殖的影响。 实验方法 1.克隆GSDML基因cDNA构建pEGFP-C3-GSDML,pIRES-GS-DML,pFLAG-CMV-2-GSDML三个真核表达载体
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