树突状细胞肿瘤疫苗前期实验模型的建立

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树突状细胞(DC)是人体内功能最强大的抗原递呈细胞,基于DC的肿瘤疫苗将有巨大的临床应用前景。肿瘤抗原的选择对于DC疫苗的效果至关重要。目前,凋亡肿瘤细胞作为一种全肿瘤抗原负载物已被广泛应用于疫苗制备,但是基于不同凋亡方法制备的DC疫苗是否具有不同的抗肿瘤效果还不清楚。因此,我们以人外周血单核细胞来源的DC和人U937肿瘤细胞株为模型,从DC表型改变和细胞因子释放方面初步研究了三种不同方法(化疗药物氮芥、紫外照射、热敏)诱导凋亡的U937细胞对DC功能的影响,并摸索了CFSE染色方法为日后确证DC疫苗的效果打下技术基础。 结果发现:吞噬凋亡U937细胞后DC上调成熟标记CD83、共刺激分子CD86的表达,增加促炎症因子TNF-a的分泌量;而表面分子CD80、HLA-DR以及免疫抑制型细胞因子IL-10的表达则与对照未成熟DC相近,促Thl反应的IL-12p70的释放量始终零。这些结果显示,吞噬不同方式凋亡的U937细胞能促进DC发育到一种部分成熟状态。这种部分成熟状态可以通过LPS的刺激进而发展成为疫苗所需的完全成熟状态,高表达MHC、CD80、CD86等分子,释放大量IL-12p70。但是,我们尚未发现不同的凋亡方法会对DC产生明显不同的影响。对这样制备的DC疫苗功能的确认还需要进行DC淋巴细胞共培养和淋巴毒实验,这些结果会为淋巴DC肿瘤疫苗的制备提供依据。而最后摸索的CFSE染色方法可用于检测后续的淋巴细胞增殖实验。
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