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目的:（1）探索葛根素对高糖及H2O2诱导的足细胞ATP生成和ROS水平的影响,评估其对氧化应激的作用;（2）探讨葛根素对高糖及H2O2诱导的足细胞mt DNA拷贝数,TFAM、NRF1的表达,TOMM22蛋白水平的影响,评估其对线粒体损伤的作用;（3）通过Seahorse Mito Stress检测足细胞线粒体呼吸功能,探究葛根素对高糖及H2O2诱导的足细胞线粒体损伤的内在机制。方法:（1）足细胞33℃增生,37℃分化5天。（2）高糖培养加不同浓度H2O2刺激,葛根素干预48h。分为:H2O2 0umol/L组、H2O2 100umol/L组、H2O2 100umol/L+葛根素3.3umol/L组、H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组、H2O2 200umol/L组、H2O2 200umol/L+葛根素3.3umol/L组、H2O2200umol/L+葛根素10umol/L组。（3）CCK-8检测细胞存活率。（4）裂解细胞提取蛋白,免疫印迹观察Tomm22的表达。（5）提取基因组DNA,q PCR检测mt DNA的表达（6）提取RNA,q PCR检测TFAM和NRF1的表达。（7）根据萤火虫萤光素酶催化其底物D-荧光素产生萤光,测定各组ATP水平。（8）足细胞6孔板爬片,Mito SOX Red染色检测ROS水平。（9）依次添加寡霉素、FCCP、ROT/AA进行Seahorse Mito Stress检测,评价线粒体基础呼吸、质子渗漏、最大耗氧量、备用呼吸能力、非线粒体氧气消耗、ATP生成、耦合效率、备用呼吸率。结果:（1）H2O2 100umol/L组（P＜0.0001）、H2O2 200umol/L组（P＜0.0001）、H2O2400umol/L（P＜0.0001）组与H2O2 0umol/L组相比,细胞抑制明显,差异具有统计学意义。（2）与H2O2 100umol/L组相比,予以葛根素3.3umol/L干预后细胞ATP水平升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。与H2O2 100umol/L+葛根素3.3umol/L组相比,H2O2 200umol/L组细胞ATP水平明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）。（3）与H2O2 0umol/L组相比,H2O2 100umol/L组mt DNA拷贝数明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.01）。与H2O2 100umol/L组相比,H2O2100umol/L+葛根素10umol/L干预后细胞mt DNA水平升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。与H2O2100umol/L+葛根素3.3umol/L组相比,H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组细胞mt DNA水平明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.01）。（4）与H2O2 0umol/L组相比,H2O2100umol/L组细胞TFAM的m RNA表达明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.001）。与H2O2 100umol/L组相比,H2O2100umol/L+葛根素3.3umol/L组TFAM的m RNA表达明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。与H2O2 200umol/L+葛根素3.3umol/L组相比,H2O2200umol/L+葛根素10umol/L组的TFAM的m RNA表达上升明显,差异具有统计学意义（P＜0.05）。（5）与H2O2 100umol/L组相比,H2O2 100umol/L+葛根素3.3umol/L组（P＜0.001）、H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组（P＜0.01）及H2O2 200umol/L+葛根素10umol/L组（P＜0.001）组细胞NRF1的m RNA表达明显升高,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L+葛根素3.3umol/L组相比,H2O2 200umol/L组细胞的NRF1的m RNA表达降低明显,差异具有统计学意义（P＜0.05）。与H2O2 200umol/L+葛根素3.3umol/L组相比,H2O2 200umol/L+葛根素10umol/L组的NRF1的m RNA表达上升明显,差异具有统计学意义（P＜0.01）。（6）与H2O2 0umol/L组相比,H2O2 100umol/L组（P＜0.0001）和H2O2 200umol/L组（P＜0.0001）ROS水平显著增加,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L组相比,H2O2 200umol/L组ROS水平明显升高,P＜0.0001,差异具有统计学意义。与H2O2 200umol/L组相比,H2O2 200umol/L+葛根素3.3umol/L组（P＜0.0001）和H2O2 200umol/L+葛根素10umol/L组（P＜0.0001）ROS生成明显降低,差异具有统计学意义。（7）与H2O2 100umol/L组相比,H2O2 200umol/L+葛根素10umol/L组线粒体外膜蛋白TOMM22生成增加,P=0.0286＜0.05,差异具有统计学意义。（8）与H2O2 0umol/L组相比,H2O2 100umol/L组（P＜0.05）和H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组（P＜0.0001）基础呼吸明显增加,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L组相比,H2O2 100umol/L+葛根素3.3umol/L组基础呼吸减少,P=0.0020＜0.05,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L组相比,H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组基础呼吸明显升高,P＜0.0001,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L组相比,H2O2 200umol/L组基础呼吸明显降低,P=0.0001＜0.05,差异具有统计学意义。H2O2 200umol/L+葛根素3.3umol/L组（P=0.0003＜0.05）及H2O2 200umol/L+葛根素10umol/L组（P=0.0005＜0.05）的基础呼吸均低于H2O2 100umol/L组,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L+葛根素3.3umol/L组相比,H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组基础呼吸明显增加,P＜0.0001,差异具有统计学意义。与H2O2100umol/L+葛根素10umol/L组相比,H2O2 200umol/L组基础呼吸明显减少,P＜0.0001,差异具有统计学意义。H2O2 200umol/L+葛根素3.3umol/L组（P＜0.0001）及H2O2 200umol/L+葛根素10umol/L组（P＜0.0001）的基础呼吸均低于H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组,差异具有统计学意义。（9）与H2O2 0umol/L组相比,H2O2 100umol/L组（P＜0.05）和H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组（P＜0.0001）质子渗漏明显增加,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L组相比,H2O2 100umol/L+葛根素3.3umol/L组质子渗漏减少,P=0.0166＜0.05,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L组相比,H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组质子渗漏明显增加,P=0.0001＜0.05,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L组相比,H2O2 200umol/L组质子渗漏明显降低,P=0.0024＜0.05,差异具有统计学意义。H2O2 200umol/L+葛根素3.3umol/L组（P=0.0095＜0.05）及H2O2 200umol/L+葛根素10umol/L组（P=0.0132＜0.05）的质子渗漏均低于H2O2 100umol/L组,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L+葛根素3.3umol/L组相比,H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组质子渗漏明显增加,P＜0.0001,差异具有统计学意义。与H2O2100umol/L+葛根素10umol/L组相比,H2O2 200umol/L组质子渗漏明显减少,P＜0.0001,差异具有统计学意义。H2O2 200umol/L+葛根素3.3umol/L组（P＜0.0001）及H2O2 200umol/L+葛根素10umol/L组（P＜0.0001）的质子渗漏均低于H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组,差异具有统计学意义。（10）与H2O2 0umol/L组相比,H2O2 100umol/L组（P＜0.05）和H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组（P＜0.05）最大耗氧量明显增加,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L组相比,H2O2 100umol/L+葛根素3.3umol/L组最大耗氧量减少,P=0.0375＜0.05,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L组相比,H2O2 200umol/L组最大耗氧量减少,P=0.0111＜0.05,差异具有统计学意义。（11）各组间备用呼吸能力不具有统计学差异（P＞0.05）。（12）与H2O2 0umol/L组相比,H2O2 100umol/L组（P＜0.05）及H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组（P＜0.0001）非线粒体氧气消耗明显增加,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L组相比,H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组非线粒体氧气消耗明显增加,P＜0.0001,差异具有统计学意义。与H2O2100umol/L组相比,H2O2 200umol/L组非线粒体氧气消耗明显下降,P=0.0002＜0.05,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L组相比,H2O2200umol/L+葛根素3.3umol/L组非线粒体氧气消耗减少,P=0.0108＜0.05,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L+葛根素3.3umol/L组相比,H2O2100umol/L+葛根素10umol/L组非线粒体氧气消耗明显增加,P＜0.0001,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组相比,H2O2200umol/L组非线粒体呼吸明显减少,P＜0.0001,差异具有统计学意义。H2O2200umol/L+葛根素3.3umol/L组（P＜0.0001）及H2O2 200umol/L+葛根素10umol/L组（P＜0.0001）的非线粒体氧气消耗均低于H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组,差异具有统计学意义。与H2O2 200umol/L组相比,H2O2200umol/L+葛根素10umol/L组（P＜0.0001）的非线粒体氧气消耗增加,差异具有统计学意义。（13）与H2O2 0umol/L组相比,H2O2 100umol/L组（P＜0.05）和H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组ATP（P＜0.05）生成明显增加,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L组相比,H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组ATP生成明显增加,P=0.0465＜0.05,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L+葛根素3.3umol/L组相比,H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组ATP水平明显增加,P=0.0013＜0.05,差异具有统计学意义。与H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组相比,H2O2 200umol/L组ATP生成明显减少,P=0.0002＜0.05,差异具有统计学意义。H2O2 200umol/L+葛根素3.3umol/L组（P=0.0002＜0.05）及H2O2 200umol/L+葛根素10umol/L组（P=0.0002＜0.05）的ATP生成均低于H2O2 100umol/L+葛根素10umol/L组,差异具有统计学意义。（14）结果表明各组间耦合效率不具有统计学差异（P＞0.05）。各组备用呼吸率,不具有统计学差异（P＞0.05）。结论:高糖及H2O2刺激可以诱导氧化应激和线粒体损伤,足细胞在高糖及H2O2刺激48h后,线粒体呼吸被抑制,备用呼吸能力减少,非线粒体氧气消耗增加,耦合率显著降低,细胞主要表现为糖酵解表型。葛根素通过增加mt DNA拷贝数,促进ATP的生成,上调TFAM、NRF1的表达,增加TOMM22的表达,减少ROS生成,增加基础呼吸、质子渗漏、最大耗氧量和非线粒体呼吸,部分缓解高糖及H2O2诱导的足细胞氧化应激及线粒体损伤。