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口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(FMD virus,FMDV)引起的牛、羊、猪等偶蹄动物的一种急性、烈性传染病,但其免疫应答机制尚不清楚。适应性免疫应答的启动需要树突状细胞(dendritic cell,DC)的抗原提呈,并且DC还能交叉提呈非复制性抗原,故被称为机体最强大的抗原提呈细胞,但目前尚不清楚DC对FMDV抗原的提呈途径。为了研究DC提呈灭活FMDV抗原的途径,研究者首先将荷载了灭活FMDV抗原的DC(FMDV~+DC)与淋巴结T细胞进行共培养,并以FMDV~+DC为对照组,在共培养后9h,12h,24h,36h和48h,取其共培养物上清液,用ELISA法对其中的IFN-γ水平进行检测,结果显示,T细胞组各时间点的IFN-γ水平都明显高于对照组。在共培养后9h和48h,T细胞组(9h:13.235 6±0.003 4;48h:6.473 8±0.002 1)和对照组(9h:1.988±0.597 4;48h:1.254 5±0.135 7)比较,差异极显著(P<0.01);共培养后12h,24h和36h,T细胞组和对照组比较,均有显著性差异(P<0.05).说明IFN-γ均来自于T细胞;为进一步明确IFN-γ是来自CD4~+T细胞,还是来自CD8~+T细胞,研究者先后用抗CD4单克隆抗体或CD8单克隆抗体阻断CD4~+T细胞或CD8~+T细胞对MHC分子的识别,并将FMDV~+DC分别与上述T细胞共培养,从而明确DC提呈灭活FMDV抗原的途径。结果显示,同对照组相比,与FMDV~+DC共培养后的CD4~+T细胞组和CD8~+T细胞组均产生高水平的IFN-γ.表明DC至少以MHC-Ⅱ类分子途径和交叉途径提呈灭活FMDV抗原。在共培养后9h和48h,CD4~+T细胞组与对照组比较,差异均为极显著(P<0.01);共培养后24h和36h,CD4~+T细胞组与对照组比较,差异均有显著性(P<0.05).并且在各个时间点,CD4~+T细胞组产生的IFN-γ量都比CD8~+T细胞组多,说明CD4~+T细胞是IFN-γ的主要来源细胞,提示DC主要以MHC-Ⅱ类分子提呈灭活FMDV抗原。为了研究蛋白酶体和溶酶体在DC处理提呈灭活FMDV抗原过程中的作用,研究者首先用灭活FMDV荷载分别用lactacystin和氯喹处理过的DC,以FMDV~+DC为对照组,然后分别和CD4~+T或CD8~+T细胞共培养。在共培养后9h,12h,24h,36h和48h,取其共培养物上清液,用ELISA法对其中的IFN-γ水平进行检测。结果显示,同对照组相比,lactacystin使CD8~+T细胞产生的IFN-γ水平升高,而氯喹则抑制CD4~+T细胞IFN-γ产生。说明DC提呈灭活FMDV抗原的过程依赖于溶酶体,而蛋白酶体不起决定性作用。这表明DC主要以“内吞小体-溶酶体-MHC-Ⅱ类分子途径”提呈灭活FMDV抗原。总之,荷载了灭活FMDV抗原的DC能够激活CD4~+和CD8~+两种T细胞,且溶酶体起主要作用,说明DC对灭活FMDV抗原的提呈途径包括MHC-Ⅱ类分子抗原提呈途径(外源性抗原提呈途径)和“内吞小体-细胞质基质-泛素-蛋白酶体-MHC-Ⅰ-CD8~+T细胞”的交叉提呈途径,并且以外源性抗原提呈途径为主。