【摘 要】
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目的：P2X受体是一种新型疼痛受体。已有研究表明，P2X受体在感觉神经元中表达，它可能在调节疼痛信息的传递上发挥作用。本研究采用足底注射P2X受体激动剂，建立大鼠疼痛模型，观察大鼠的伤害性反应，并采用免疫组化的方法，测定大鼠背根神经节(DRG)上的P2X受体，以及相应脊髓节段背角上的P物质受体NK和谷氨酸受体NDMR的表达。并于椎管内注射P物质和谷氨酸受体拮抗剂，进一步观察动物行为学变化及脊髓背角
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目的：P2X<,3>受体是一种新型疼痛受体。已有研究表明，P2X<,3>受体在感觉神经元中表达，它可能在调节疼痛信息的传递上发挥作用。本研究采用足底注射P2X<,3>受体激动剂，建立大鼠疼痛模型，观察大鼠的伤害性反应，并采用免疫组化的方法，测定大鼠背根神经节(DRG)上的P2X<,3>受体，以及相应脊髓节段背角上的P物质受体NK<,1>和谷氨酸受体NDMR<,1>的表达。并于椎管内注射P物质和谷氨酸受体拮抗剂，进一步观察动物行为学变化及脊髓背角NK<,1>和NDMR<,1>的表达。旨在探讨P2X<,3>受体在介导外周伤害刺激引起疼痛的作用机制。
方法：
1.健康成年雄性SD大鼠30只，体重250-300g随机分为5组，每组6只(n=6)。A组：正常对照组(左后足底注射生理盐水100μl)；B组：左后足底注射P2X3受体激动剂ATP(1μmol/L)100ul；C组：左后足底注射P2X3受体强效激动剂α、β-meATP(0.6μmol/L) 100μl；D组：左后足底注射P2X3受体强效激动剂和P2X3受体特异性拮抗齐α、β-meATP (0.6μmol/L ) 100μl+TNP-ATP(0.3μmol/L)100μl; E组：左后足底注射P2X3受体激动剂和P2X3受体拮抗剂 ATP(1μumol/L)100μl+TNP-ATP(0.3μmoL/) 100Bμl。观察缩脚次数，每5分钟作为一个观察单位，持续观察一个小时。分离大鼠DRG。采用免疫组化的方法分别测定每组DRG上P2X<,3>受体的表达及相应节段脊髓背角上的NK1和NDMR1的表达。
2.成年SD雄性大鼠30只，随机分为5组，每组6只(n=6)。A组：正常对照组，大鼠椎管注射生理盐水50μl；B 组：椎管注射P2X<,3>受体拮抗剂TNP-ATP(0.3μmol/L) 100μl；C组：椎管注射谷氨酸受体拮抗剂(L-701，3142)5μg；D组：椎管注射P物质拮抗剂(S3144)，8μg，E组：椎管注射(L-701，3142+S3144)8μg+5μg。所有组别均在椎管注射后左后足底注射P2X<,3>受体强效激动剂a、βme-ATP(0.6μmol/L)100μl，及椎管内注射0.1％二甲基亚枫10μl，动物行为学观察方法同前，取其相应节段的脊髓，采用免疫组化法分别测定各组相应节段脊髓背角神经元及星形胶质细胞上的NK1和NDMR1的表达。
结论：
1.P2X<,3>受体主要表达在DRG上的中小神经元上。
2.大鼠疼痛是由P2X3受体介导，并和脊髓背角上的NK<,1>和NDMR<,1>受体激活有关。
3.P2X<,3>受体兴奋，可使DRG释放P物质和谷氨酸并与相应脊髓背角受体结合，介导疼痛信号传导。
4.脊髓背角上星形胶质细胞存在NK<,1>和NDMR<,1>受体该受体也可能参与P2X<,3>受体介导的疼痛信号传导。
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