【摘 要】
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目的:研究免疫球蛋白超家族成员3（immunoglobulin superfamily member 3,IGSF3）在颞叶癫痫（temporal lobe epilepsy,TLE）患者术后颞叶皮层标本及海人酸（kainic acid,KA）慢性癫痫模型小鼠脑中的表达情况,及IGSF3下调对戊四氮（pentylenetetrazol,PTZ）慢性点燃模型小鼠癫痫发作的影响。方法:1.收集8例难治
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目的:研究免疫球蛋白超家族成员3（immunoglobulin superfamily member 3,IGSF3）在颞叶癫痫（temporal lobe epilepsy,TLE）患者术后颞叶皮层标本及海人酸（kainic acid,KA）慢性癫痫模型小鼠脑中的表达情况,及IGSF3下调对戊四氮（pentylenetetrazol,PTZ）慢性点燃模型小鼠癫痫发作的影响。方法:1.收集8例难治性TLE患者（TLE组）、6例颅脑外伤患者（CON组）术后颞叶皮层组织标本。用蛋白印迹（western blot,WB）检测IGSF3在TLE组和CON组中的表达水平,免疫荧光染色法（Immunofluorescence,IF）观察IGSF3在TLE组中的分布情况。2.构建KA慢性癫痫模型（KA组）,海马内注射生理盐水的小鼠为对照（con组）。应用WB分别在皮层、海马中检测IGSF3在KA组、con组中的表达情况,应用IF检测IGSF3在KA组海马中的分布,应用免疫组织化学染色检测IGSF3在KA组、con组海马齿状回（dentate gyrus,DG）区的表达情况。3.构建IGSF3干扰慢病毒载体转染小鼠海马DG区,对照组转染同体积的阴性对照慢病毒。转染第14天应用WB检测IGSF3沉默效率。第15天开始行PTZ慢性点燃癫痫模型造模,行为学观察并记录每次注射后每只小鼠癫痫发作最高等级。结果:1.WB结果显示IGSF3在TLE组（n=8）较CON组（n=6）中表达明显升高（P＜0.05）;KA组（n=5）的皮层及海马中IGSF3表达高于con组（n=5,P＜0.05）。免疫组织化学检测显示IGSF3在KA组小鼠海马DG区表达较con组升高（n=5,P＜0.05）。2.免疫荧光结果显示在TLE组颞叶标本、KA组小鼠的海马中IGSF3均分布在神经元与星形胶质细胞上。3.WB显示IGSF3干扰慢病毒载体转染第14天可有效敲低小鼠海马IGSF3的表达（n=3,P＜0.05）。4.PTZ慢性点燃模型行为学观察显示海马区敲低IGSF3表达可减少小鼠达4-5级发作所需注射次数,并且可提高各时间点发作级别。结论:1.IGSF3在难治性TLE患者颞叶皮层中表达增高。2.IGSF3在KA慢性癫痫小鼠皮层及海马中表达增高。3.在难治性TLE患者颞叶皮层、KA慢性癫痫小鼠海马中,IGSF3在神经元和星形胶质细胞上都有分布。4.慢病毒介导的IGSF3下调可提高PTZ慢性点燃小鼠癫痫易感性,IGSF3可能对癫痫起抑制作用。具体机制待进一步研究阐明。
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