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研究背景妊娠期糖尿病（Gestational Diabetes Mellitus，GDM）指在妊娠期出现或首次诊断的不同程度的糖耐量受损（不包括糖尿病合并妊娠），它对母儿的健康造成不同程度的危害。研究发现，除胰岛素外，瘦素也是GDM发病过程中的重要参与者。瘦素通过与瘦素受体（leptin receptor，LepR）结合而启动瘦素的生物学功能。目前被人们认知的瘦素受体共6种亚型，可分为跨膜瘦素受体（a、b、c、d、f）和可溶性瘦素受体（e）。跨膜瘦素受体常表达于下丘脑中枢及外周组织，主要参与瘦素功能的发挥。可溶性瘦素受体（soluble leptin receptor，sLR）主要存在于外周血中，是瘦素结合、运转蛋白，参与调节瘦素的生物可利用率、敏感性等，而人类sLR由金属蛋白酶水解跨膜瘦素受体胞外区脱落而成，故sLR可反映跨膜瘦素受体的表达情况，因此跨膜瘦素受体的异常可导致sLR浓度发生变化。妊娠时胎盘可表达瘦素及跨膜瘦素受体，胎盘瘦素是孕母血瘦素升高的主要来源，而胎盘跨膜瘦素受体可水解生成sLR，造成血sLR随妊娠进展而升高，这可促进瘦素生物活性的发挥，使正常妊娠时糖脂代谢维持平衡。GDM时，跨膜瘦素受体和/或sLR的浓度与GDM的联系尚无研究明确。但有关于代谢综合征及2型糖尿病的研究指出肥胖个体存在高瘦素血症、低sLR水平，具有明显的瘦素抵抗；且血清低sLR将导致2型糖尿病发病风险增加，这些研究都显示血清sLR水平与肥胖、瘦素抵抗、胰岛素抵抗负相关。那么GDM时，是否存在血清sLR异常和/或生成sLR的原料——跨膜瘦素受体的异常而导致严重的瘦素抵抗、胰岛素抵抗，目前仍不明确。因此本研究旨在从瘦素受体角度探讨妊娠期糖尿病与正常妊娠间的是否存在差异，使GDM机制的研究进一步深入，为GDM的防治提供理论依据。目的从瘦素受体出发，分析了解正常妊娠、GDM孕妇血清sLR浓度随孕周变化特点及GDM发病是否与血sLR浓度改变相关，了解孕晚期胎盘及脂肪组织sLR生成者——跨膜瘦素受体的表达情况，从而揭示瘦素受体（特别是sLR）异常是否与GDM相关联，为探索GDM的发病机制提供可能的新视点。方法1、随机选取孕14-19周、30-34周及足月孕分娩前（≧37周）三个孕龄段正常妊娠孕妇各100例、同孕龄GDM孕妇（排除合并其他疾病）各20例及未孕健康女性20例。采用酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法测定各组血清可溶性瘦素受体（sLR）水平，分析正常妊娠孕妇和GDM孕妇两组孕妇血sLR水平随孕周变化特点，比较两组间同孕龄血sLR水平有无差异性，研究血sLR浓度与GDM发生有无相关性；2、 Western blotting、荧光定量qRT-PCR法检测正常孕妇及GDM孕妇足月孕时胎盘和脂肪组织的长型跨膜瘦素受体（long form of leptin receptor，OB-Rfl）、短型跨膜瘦素受体（short form of leptin receptor，OB-Rfs）蛋白水平及mRNA水平，比较两组间是否存在差异，推测跨膜瘦素受体变化是否与GDM相关，进一步证实跨膜受体来源的sLR与GDM的相关性。结果第一部分：（1）正常妊娠组各孕龄期sLR浓度均显著高于未孕组，差异有统计学意义(P<0.05)，且组内各亚组间相比差异均具有显著性（P<0.05），即随着妊娠孕龄进展，sLR浓度升高；（2） GDM孕妇各孕龄段sLR浓度分别与未孕组相比，差异均无统计学意义（P>0.05），且随孕周增加该组内各亚组间sLR浓度无显著性差异（P>0.05）；而GDM组内各亚组孕妇sLR浓度均显著低于同孕龄段正常妊娠组（P<0.05）；（3）在a：<4.0ng/ml、b：4.0~7.9ng/ml、c：8.0~11.9ng/ml、d：≥12.0ng/ml4个sLR浓度水平上，GDM例数及所占比例分别为29（30.53%）、20（15.63%）、9（13.64%）、2（2.82%），两两比较GDM比例，差异具有显著性（P<0.05，除b与c间比较P>0.05），GDM比例随血清sLR浓度升高而降低。第二部分：正常妊娠和GDM组孕妇胎盘组织OB-Rfl、OB-Rfs蛋白和mRNA的表达均显著高于脂肪组织（P<0.05）；与正常妊娠组相比，GDM组脂肪组织OB-Rfl、OB-Rfs蛋白和mRNA的表达均升高（P<0.05）；而GDM孕妇胎盘组织上，OB-Rfl蛋白和mRNA表达均降低，OB-Rfs蛋白和mRNA表达却升高，差异具有显著性（P<0.05）。结论1.正常妊娠时，孕妇血sLR浓度显著高于未孕时，且随着妊娠进展显著升高；GDM患者sLR浓度与未孕期无显著性差异，也不随孕周增加而变化，但却显著低于同孕期正常妊娠孕妇；孕妇血清sLR浓度越低，则GDM发生的可能性越高，这提示sLR浓度降低引起妊娠期瘦素抵抗增强，糖脂代谢紊乱，从而导致GDM发生。2.足月孕时，正常妊娠、GDM孕妇胎盘OB-Rfl、OB-Rfs表达水平均显著高于脂肪组织，表明孕期血sLR的升高主要来源于胎盘组织的膜瘦素受体；GDM孕妇脂肪组织OB-Rfl、OB-Rfs表达均高于正常妊娠孕妇，是由于低浓度血sLR反馈调节所致；特别的是，GDM胎盘组织上的OB-Rfl表达水平降低，OB-Rfs表达却反而升高，提示GDM时血清中sLR浓度降低可能不仅与胎盘膜瘦素受体表达异常有关，还可能与剪切跨膜瘦素受体的金属蛋白酶等酶活性有关。