【摘 要】
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本研究从肿瘤基因治疗的角度入手,研究抗菌肽hCAP-18/LL-37基因转染介导的抗肿瘤作用及其机制。采用本室已构建的重组质粒pcDNA4/Myc-His-LL-37,应用脂质体转染法将重组质粒
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本研究从肿瘤基因治疗的角度入手,研究抗菌肽hCAP-18/LL-37基因转染介导的抗肿瘤作用及其机制。采用本室已构建的重组质粒pcDNA4/Myc-His-LL-37,应用脂质体转染法将重组质粒瞬时转染Lewis肺癌细胞,分别从细胞分子水平和整体水平研究hCAP-18/LL-37对Lewis肺癌细胞增殖活性和荷瘤小鼠的抑瘤效应及免疫功能的影响。采用MTT法和平板克隆实验观察基因转染Lewis肺癌细胞增殖活性变化;采用MTT法检测基因转染Lewis肺癌细胞培养上清对小鼠淋巴细胞增殖活性的影响;采用RT-PCR方法分析基因转染Lewis肺癌细胞TLR4mRNA表达;计算荷瘤小鼠抑瘤率;采用MTT法检测荷瘤小鼠淋巴细胞增殖活性、NK细胞及CTL细胞杀伤活性。结果表明:基因转染hCAP-18/LL-37能降低Lewis肺癌细胞增殖能力,降低Lewis肺癌细胞培养上清对小鼠淋巴细胞增殖产生的抑制作用,导致Lewis肺癌细胞TLR4mRNA表达下降;LL-37基因转染Lewis肺癌细胞后接种C57BL/6小鼠,其对荷瘤鼠抑瘤效应不明显,LL-37基因转染组荷瘤鼠淋巴细胞增殖活性与对照组比较无显著差异,NK细胞及CTL细胞杀伤活性与对照组比较活性增强。研究结果提示hCAP-18/LL-37基因转染Lewis肺癌细胞,在细胞水平能抑制肿瘤细胞增殖,降低与肿瘤发生发展相关的TLR4mRNA表达;在整体水平,LL-37基因转染对荷瘤鼠抑瘤效应不明显,对荷瘤鼠NK、CTL活性有一定促进作用。本实验为抗菌肽在肿瘤基因治疗方面提供了实验依据,有助于完善抗菌肽hCAP-18/LL-37的抗肿瘤作用机制研究。
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