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背景:骨骼肌细胞呈现免疫学特性,主动参与局部免疫应答。它们能够通过主要组织相容性复合物呈递抗原,并能够分泌可溶性肌细胞因子,这些分子以促炎或抗炎方式主动参与损伤肌组织修复再生过程以及炎性肌病的病理过程。了解骨骼肌细胞免疫学特性有助于确定肌损伤与炎性肌病的新治疗靶点。非折叠蛋白反应(Unfolded Protein Responses,UPR)是一种适应性反应,旨在恢复内质网应激条件下内质网的稳态。研究表明UPR的功能超出了其传统认定功能,并与其他功能相交叉,如先天免疫和抗原呈递。UPR也被认为参与骨骼肌的修复再生过程,并调节肌肉的重塑。那么,炎性刺激诱发的肌纤维UPR是否直接影响肌纤维自身的免疫特征?具体由哪些UPR通路参与对肌纤维免疫功能的调节?目前尚无相关的研究报道。目的分析急性肌损伤诱导的炎性环境以及体外炎性刺激对肌组织和肌细胞内UPR的影响;明确UPR对体外炎性刺激诱导的肌细胞免疫表型的影响并进一步分析UPR影响肌细胞免疫表型的机制。方法采用qRT-PCR等分析心脏毒素(cardiotoxin,CTX)诱导的急性肌损伤以及体外炎性刺激与肌细胞UPR-IRE1α轴活化的相关性;应用Western blot技术、Luminex技术以及小分子化学抑制剂干扰UPR活化功能性等研究UPR-IRE1α信号轴活化对炎性环境中肌细胞免疫特性的影响并深入探讨UPR-IRE1α信号轴通过分裂原激活的蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)p38MAPK信号通路影响肌细胞细胞炎性分子的表达;通过流式细胞术进一步探讨UPR-IRE1α信号轴调节肌细胞免疫表型对肌细胞免疫功能的影响。结果1.CTX肌内注射可成功诱导小鼠急性肌损伤。肌损伤炎症及再生早期,肌组织内UPR显著激活,但UPR活化随肌修复的完成逐渐下调。此外,CTX损伤后,再生肌纤维内可见UPR的活化,尤其是eIF2α和IRE1α通路的激活。2.体外IFN-γ促炎刺激可诱导原代分化培养的肌细胞上调表达UPR通路中的eIF2α和IRE1α信号标志分子水平。3.体外IFN-γ促炎刺激可诱导原代分化肌管表达MHC-Ⅰ(H-2Kb)、MHC-Ⅱ(H2-Ea)、TLR3、以及肌促炎因子。UPR通路阻断,尤其是IRE1α通路阻断时,上述炎症分子的水平进一步上调。4.IRE1α通路阻断时,接受IFN-γ促炎刺激的原代肌纤维内p38 MAPK活化程度显著上调,而p38MAPK阻断却显著下调肌纤维内免疫相关分子水平。若同时阻断IRE1α和p38 MAPK,肌纤维不再上调炎症分子水平。5.在IFN-γ促炎培养系统中添加OVA抗原,并将IRE1α通路预先阻断的原代肌纤维与OT-I细胞共培养,可促进OT-I T细胞的增殖,若进一步抑制p38 MAPK则反转了 OT-I T细胞的增殖促进效应。结论在持续的促炎环境中,激活的UPR信号有助于抑制肌纤维的免疫学功能。这种抑制作用可能通过肌纤维内激活的IRE1α通路下调p38 MAPK信号而实现。