原发性肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,综合治疗对于不能手术切除的肝癌仍是主要的治疗手段。化疗在肝癌的综合治疗中占有重要地位,已成为肝癌外科治疗中不可缺少的一部分。由于传统化疗药物存在复发率高、敏感性低、易产生多药耐药性等缺点而效果不佳,因此寻求新的有效的化疗药物对于肝癌化疗有着尤为重要的意义。近年来,砷剂复合物亚砷酸由于在急性早幼粒细胞白血病的化疗中疗效显著且无骨髓抑制等特点而引起了人们的关注,相关机制研究表明亚砷酸治疗白血病的机制主要与其抑制白血病细胞增殖、诱导细胞凋亡及分化有关。随后的研究显示亚砷酸不仅对白血病细胞有作用,而且对一些实体性肿瘤细胞也有作用;然而其对人肝癌细胞的作用及其机制迄今仍尚未充分阐明。在本实验中,我们以人肝癌BEL-7402细胞株为研究对象,在体外观察了亚砷酸对BEL-7402细胞增殖分化及凋亡的影响并初步探讨了其可能的作用机制,以期为亚砷酸应用于肝癌的临床化疗提供一定的理论依据。 目的 探讨亚砷酸对体外培养的人肝癌细胞株BEL-7402的生物学效应及其相关的作用机制。 方法 第一部分 亚砷酸对人肝癌细胞增殖、分化的影响及其相关机制研究 通过体外细胞培养,用四氮唑盐(MTT)比色法观察亚砷酸对BEL-7402细胞生长曲线及生长抑制率的影响,台盼蓝拒染法观察细胞群体倍增时间(TD)的改变,细胞集落形成试验观察亚砷酸对BEL-7402细胞增殖的影响;并分别用自动化学发光法、生化法检测亚砷酸对细胞甲胎蛋白(AFP)合成及谷氨酰转肽酶(GGT)、乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响;用苏木精-伊红(HE)染色法及透射电镜观察细胞的分化形态特点;免疫组织化学法观察亚砷酸对BEL-7402细胞增殖细胞核抗原(PCNA),c-Myc,人类端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白表达的影响。