Klotho基因多态性及蛋白水平与CKD5期并骨密度下降相关性研究

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目的:研究klotho基因多态性及蛋白水平与CKD5期并骨密度下降相关性研究。方法:62例CKD5期(B组)患者和30例健康对照组(A组)患者被纳入研究。利用双能X线骨密度仪对CKD5期组患者行骨密度测量,并根据WHO骨密度分型标准对测量结果进行分组:骨量正常组(B0组,23例)、骨量减少组(B1组,22例)及骨质疏松组(B2组,17例)。采集两组病人静脉血4m1,两管分装。其中一管运用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction, FQ-PCR)技术检测Klotho基因G-395A位点的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP);另外一管分离血清后利用Elisa法检测上清液中Klotho蛋白水平。比较分析各组间基因型频率、等位基因频率与Klotho蛋白及临床指标相关性。结果:①所选样本Klotho基因G-395A位点基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡。Klotho基因G-395A位点多态性中,GG、GA及AA基因型频率分别为0.674(60例),0.272(27例),0.054(5例); G和A等位基因频率分别为0.799和0.201。②Klotho基因G-395A基因型及等位基因频率比较中:A组和B组比较两者均无统计学意义(Χ2=0.449, P=0.503; Χ2=1.446, P=0.229)。B1组与B0组、B2组比较两者亦均无统计学意义(Χ2=1.171,P=0.279; Χ2=1.748, P=0.186; Χ2=1.947, P=0.163; Χ2=2.218, P=0.136)。B2组GA+AA基因型频率高于B0组(x2=5.736,P=0.017),B2组A等位基因频率较B0组高(Χ2=7.207, P=0.007)。B1+B2组与B0组比较在基因型上无统计学意义,但A等位基因在B1+B2组中高于B0组(Χ2=3.696, P=0.055; x2=4.718, P=0.030)。③采用方差分析比较各组Klotho蛋白水平,B组血清Klotho蛋白水平明显低于A组(F=23.544,P=0.000),A组高于B0、B1及B2组(三组P值均<0.01),B2组低于B0组(P=0.049),B1与B0及B2组比较无统计学差异(P=0.669;P=0.377)。④B组中血清Klotho蛋白水平与临床各生化指标无直线相关性(P均>0.05)。⑤采用二元Logistic回归分析显示,血清Klotho蛋白是CKD5期发生的保护性因素(OR=0.96,P=0.000)。血Klotho蛋白、GFR、体重及BMI为CKD5期骨密度下降的保护因素(OR分别为0.89,0.58,0.77,0.22,P均<0.05),年龄及GA+AA型为危险因素(OR分别为3.2,14.74,P均<0.05)。结论:①在扬州地区汉族人群中存在Klotho基因G-395A多态性。②Klotho基因G-395A位点A等位基因可能是CKD5期骨密度下降遗传危险因素。③血清Klotho蛋白水平降低是CKD发生及骨密度下降的独立危险因素。④年龄、GFR是CKD5期患者骨密度下降独立危险因素,体重及BMI是其独立保护因素。
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