手性与我们的生活息息相关，获得单一对映异构体具有重要的社会和经济效益。虽然手性拆分的方法很多，但液相色谱法中的手性固定相法因操作方便、高效而备受关注。手性固定相法的核心是手性填料，但目前还没有一种万能的手性固定相填料，不同的手性固定相具有不同的分离选择性，开发新型手性固定相填料为化合物的手性拆分提供充分的可能性。本论文成功制备了羧甲基-β-环糊精手性固定相（CM-β-CD CSP）和舍曲林手性固定相两种填料。　　在水溶液中以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐为缩合剂，将实验室自制CM-β-CD键合到氨基硅胶上得到CM-β-CD CSP。CM-β-CD采用傅里叶变换红外光谱、高分辨质谱、核磁共振和X射线粉末衍射等方法表征;CM-β-CD CSP采用傅里叶变换红外光谱、元素分析和热分析等方法表征。CM-β-CD CSP的性能评价由三部分工作组成，分别以59种外消旋体、17种顺式β-内酰胺和26种氨基酸衍生物为分析物。第一部分工作中，在59种分析物中分别选取一个中性、酸性和碱性化合物为代表性化合物，反相模式下，考察了流动相中盐种类和浓度、pH、有机溶剂种类和浓度以及分析物结构对分离效果的影响。综合分析各因素对三种不同性质化合物的保留和分离度影响，选择流动相条件为0.50％醋酸铵-甲醇，调整流动相中甲醇浓度，约60％的手性化合物在CM-β-CD CSP上得到有效分离。以18种手性化合物为代表，比较了羧甲基衍生的β-环糊精手性固定相与商品化的未衍生β-环糊精手性固定相手性分离能力。结果表明，羧甲基衍生的β-环糊精手性固定相具有更好的对映选择性。以化合物25为目标化合物，考察了CM-β-CD CSP的线性、检测限、定量限和稳定性。经研究，两个对映异构体在25μg/mL-500μg/mL浓度范围内线性关系良好，相关系数均大于0.999。第一个和第二个对映异构体的检测限分别为5.10×10-9mol和4.71×10-9mol;定量限分别为1.69×10-8mol和1.58×10-8mol。峰面积平均RSD％值小于1.3％，保留时间平均RSD％值小于0.3％。以上数据表明CM-β-CD CSP色谱柱具有良好的稳定性和重复性。对CM-β-CD CSP上残余氨基用醋酐封端得到乙酰化-CM-β-CD CSP，封端后手性固定相无手性分离能力。　　CM-β-CD CSP反相模式下拆分17种顺式β-内酰胺手性化合物，考察了流速、流动相pH、盐种类和浓度、流动相中甲醇浓度对分离效果的影响。综合考虑所有化合物的保留和分离度，以（0.10％醋酸铵+甲酸）(pH5.0)-甲醇(70/30，v/v)为流动相条件，流速为1.0mL/min。与未衍生β-环糊精手性固定相分离相比，CM-β-CD CSP对17种顺式β-内酰胺化合物的保留更强;除18CA、18EA和15BA，CM-β-CD CSP对其余14种顺式-β-内酰胺化合物手性选择性优于未衍生β-环糊精手性固定相。根据各种影响因素对CM-β-CD CSP分离能力的影响，以15CA为目标化合物，推导了CM-β-CD CSP对顺式-β-内酰胺可能的包接模型及拆分机理。研究分析物结构对分离效果的影响，结果表明氢键、偶极和立体位阻等作用对手性分离有重要影响。　　对26种氨基酸进行1-萘甲酰氯和1-氯-2，4-二硝基苯衍生，高效液相色谱和液相色谱-质谱联用技术表明对大多数氨基酸化合物两种衍生方法可行。反相模式下，以0.50％醋酸铵-甲醇为流动相，衍生成功的氨基酸衍生物为分析物，对CM-β-CD CSP进行性能评价，考察了流动相中有机溶剂含量对手性分离的影响。以6种氨基酸为代表，讨论了分析物结构和不同衍生试剂对手性分离的影响。结果表明，分析物结构是影响手性分离的重要的因素。　　舍曲林手性固定相的制备以舍曲林为手性选择子，无水二氯甲烷为溶剂，在氯甲酸乙酯存在下，将舍曲林键合到自制的马来酸酐衍生的氨基硅胶上得到的一种π-酸Pirkle型手性固定相。通过元素分析、傅里叶红外变换光谱和热分析技术表征了该手性固定相。正相模式下，以7种π-碱性手性化合物为分析物，考察了流动相中有机溶剂的种类和浓度、酸碱改性剂和流速等因素对手性分离的影响。虽然不同化合物受不同溶剂影响不同，但乙醇与异丙醇、乙酸乙酯和四氢呋喃相比，更有利于大多数化合物手性分离，实验最终以5％(v/v)乙醇为流动相中有机溶剂改性剂。酸性改性剂（醋酸）与碱性改性剂（二乙胺）相比，更利于分析物的洗脱和分离，所以流动相中选择加入酸性改性剂，浓度为0.2％(v/v)。流速由0.5mL/min增加到1.0mL/min，各目标化合物的保留减弱，分离度值变化不同。综合考虑所有化合物的分离度效果，选用流速为1.0mL/min。