背景和目的丙型肝炎是一种常见的由丙型肝炎病毒引起的肝脏疾病,常导致肝硬化和肝细胞癌。全世界约有1.7亿人感染丙型肝炎病毒,丙型肝炎已成为一个对公共健康有重大影响的疾病。目前尚无针对丙型肝炎的保护性疫苗,目前的标准治疗方法-长效干扰素联合利巴韦林疗效有限,费用昂贵,副作用大。在今后20年内,由丙型肝炎引起的肝硬化和肝癌患者数量将会继续增加。因此,目前迫切需要针对丙型肝炎更为有效的预防措施和治疗方法。丙型肝炎病毒是一种单链包膜RNA病毒,属于黄病毒科嗜肝病毒属,由5’非编码区(包括内部核糖进入位点),开放读码框(编码结构蛋白和非结构蛋白)和3’编码区构成。构成病毒颗粒的结构蛋白包括核心蛋白和包膜糖蛋白E1和E2。非结构蛋白包括P7离子通道,NS2-3蛋白酶,NS3丝氨酸蛋白酶和RNA解旋酶,NS4A多肽,NS4B和NS5A蛋白以及NS5B-RNA依赖性RNA聚合酶。病毒入侵是病毒-宿主细胞相互作用产生感染的第一步。HCV病毒入侵是多因素参与的复杂过程,包括宿主细胞因素：SR-BI, CD81, CLDN1和OCLN,为抗病毒治疗提供了多个新的靶点。在这些宿主受体中,紧密连接蛋白-CLDN1是一个非常有前景的抗病毒靶点,因为它对HCV入侵至关重要,且目前未发现CLDN1非依赖性HCV入侵。而且,CLDN1在病毒细胞间传播中发挥重要作用。病毒可以以两种方式在宿主细胞间传播：将病毒释放至细胞外或直接将病毒由感染细胞传递给非感染细胞。通常,病毒在细胞间的直接传递更为迅速有效,因为这一过程省去了病毒粘附等病毒生命周期中的限速步骤。最近的研究成功建立了HCV细胞培养模型,使病毒能在细胞培养中传播,该模型为研究病毒传播创造了条件。HCV感染肝癌细胞常呈现为相邻细胞间的灶状感染,提示病毒在相邻细胞间传播。最近研究表明,HCV可以在体外以两种方式传播,细胞外病毒感染或病毒在细胞间的直接传播,后者可以逃避中和抗体的攻击。这种HCV细胞间的直接传播依赖CLDN1的表达,并存在CD81非依赖型细胞间传播。方法在体外建立HCVpp及HCVcc模型。通过基因免疫制备anti-CLDN1多克隆及单克隆抗体。应用anti-CLDN1单克隆抗体在HCV细胞培养中预防HCV感染。在HCV传播试验中应用anti-CLDN1多克隆抗体及HCV患者血清抑制HCV传播。结果我们成功制备了CLDN1多克隆及单克隆抗体。抗-CLDN1抗体与人源性CLDN1外环在细胞高亲和性结合并对肝癌细胞(Huh7.5.1)无细胞毒性。在体外,该抗体剂量依赖性抑制HCV所有主要基因型,HCV准种和具有高感染性的HCV免疫逃逸株,联用抗HCV糖蛋白抗体和CLDN1对HCV感染具有相加/协同效应。为研究CLDN1抗体对HCV传播的抑制作用,我们建立了HCV传播模型,用来评估抗-CLDN1抗体和HCV患者血清对HCV传播的抑制作用。结果显示,二者都能有效抑制HCV细胞外病毒传播。但仅有抗-CLDN1抗体有效抑制HCV细胞间的传播,HCV患者血清对HCV细胞间传播影响很小。结论与其他研究者报道一致,HCV可以逃避患者血清里中和抗体的中和作用。在体外模型中,抗-CLDN1抗体可以抑制HCV入侵和病毒的传播。针对HCV受体的抗体,尤其是抗-CLDN1抗体,可望成为新的抗病毒治疗方法应用于预防HCV感染以及限制病毒在慢性HCV感染者中的传播。