目的采用高效液相色谱法同时测定四逆汤中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰乌头次碱、异甘草素、甘草酸和6-姜酚6个成分的含量。方法采用Waters Terra C18色谱柱(3.0mm×100mm,3.5μm),检测波长:除异甘草素外的5种成分采用235nm检测,异甘草素采用370nm的检测波长;流动相为A:95%乙腈和5%水的混合溶液(0.1%甲酸+5mmol/L醋酸铵),B:0.1%甲酸水溶液(5mmol/L醋酸铵),梯度洗脱,A相随时间的变化:25%～35%(0～5min),35%～50%(5～15min),50%～85%(15～20min);流速0.5mL/min;柱温25℃;进样量5μL。四逆汤按照传统煎煮方法提取。结果 6个指标性成分苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰乌头次碱、异甘草素、甘草酸、6-姜酚分别在5.600～112.0、6.560～131.2、6.130～122.6、4.590～91.8、31.00～620.0、4.920～98.4μg/mL范围内线性良好(r>0.999 0),在15min内实现完全分离。方法学考察表明,日内及日间精密度RSD<5%,加样回收率(n=6)分别为101.07%(RSD=1.3%)、98.72%(RSD=1.1%)、101.57%(RSD=1.8%)、101.71%(RSD=3.6%)、102.12%(RSD=2.3%)、99.58%(RSD=3.8%)。结论该方法简便、准确、实用性强,可用于四逆汤中6个指标性成分的含量测定。