表达产甲酸草酸杆菌草酸分解基因的人肝细胞系的构建

来源 :临床泌尿外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hudongfei
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目的:构建表达产甲酸草酸杆菌(Ox.F)草酸分解基因的人肝细胞系,探索高草酸尿的治疗方法。方法:分离培养人肠道Ox.F并克隆其功能基因OXC和fre,构建同时表达OXC和fre的真核双表达载体质粒pIRES—oxc-frc,将pIRES-oxe—fre转染人正常肝细胞系L—02。用RT—PCR和Western blot技术了解转基因细胞的目的基因表达状况;用离子色谱法测定转基因后细胞培养液中草酸浓度,了解其草酸分解功能。结果:转基因后人肝细胞系L-02在mRNA和蛋白质水平均成功表达OXC和fre基因,其
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