尿道下裂子鼠生殖结节中的间充质-上皮转化作用

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fengfeiyuren
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目的

观察尿道下裂子鼠生殖结节中成纤维细胞的间充质-上皮转化现象,探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)导致尿道下裂的机制。

方法

取孕SD大鼠,随机分为DBP组和对照组。于怀孕第13~19天,DBP组按照800 mg/kg体重DBP溶入玉米油(DBP和玉米油总剂量为3 ml/kg体重)后灌胃,对照组按照3 ml/kg体重玉米油灌胃。怀孕19 d取出子鼠,鉴别出DBP组中发生尿道下裂的雄性子鼠及对照组中的雄性子鼠并分为尿道下裂组和正常对照组,提取两组子鼠的生殖结节。用组织块法原代培养子鼠生殖结节中的成纤维细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化,划痕实验检测细胞迁移能力变化,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的mRNA表达,Western blot检测E-cadherin、Vimentin的蛋白表达。

结果

对照组的尿道开口于生殖结节顶端,而尿道下裂组的尿道开口于生殖结节腹侧,肛门生殖结节距离[(1.43±0.04) mm]明显小于对照组[(2.27±0.09) mm,P=0.023]。子鼠尿道下裂发生率为40.5%。与对照组比较,尿道下裂组生殖结节成纤维细胞形态发生了变化,细胞呈多边型,丝状伪足变短,细胞排列较紧密,平均迁移距离缩短[12 h:(0.17±0.04) mm比(0.14±0.03) mm、24 h:(0.26±0.05) mm比(0.20±0.04) mm,P=0.041],E-cadherin的mRNA和蛋白相对表达量增加、Vimentin的mRNA和蛋白相对表达量降低(E-cadherin、Vimentin mRNA相对表达量:1.00±0.00比1.43±0.31(P=0.034)、1.00±0.00比0.51±0.12(P=0.031);E-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量:0.15±0.06比1.59±0.84(P=0.005)、1.88±0.45比0.30±0.13(P=0.003)。

结论

DBP在诱导子鼠发生尿道下裂的过程当中,促进了子鼠生殖结节中成纤维细胞的间充质-上皮转化作用,这可能与导致尿道下裂的发生有关。

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