【摘 要】
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目的 探讨程序性死亡配体1(PD-L1)在索拉非尼耐药人肝癌细胞中的表达及其功能.方法 采用浓度递增法构建索拉非尼耐药人肝癌细胞株(Hep3B-SR和HepG2-SR),用CCK-8法检测半数抑
【机 构】
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陆军军医大学(第三军医大学)研究生院,重庆,400038;成都军区总医院肿瘤诊治中心,成都,610083;
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目的 探讨程序性死亡配体1(PD-L1)在索拉非尼耐药人肝癌细胞中的表达及其功能.方法 采用浓度递增法构建索拉非尼耐药人肝癌细胞株(Hep3B-SR和HepG2-SR),用CCK-8法检测半数抑制浓度(IC50)并计算耐药指数,蛋白质印迹法和qPCR检测P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和PD-L1的表达.转染siRNA沉默耐药细胞PD-L1的表达并检测沉默效率.沉默PD-L1表达后,CCK-8法检测IC50、计算耐药指数,并检测耐药基因的表达,用细胞增殖实验检测细胞增殖情况,划痕实验检测细胞迁移情况,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 Hep3B-SR和HepG2-SR的耐药指数分别为5.4和5.2.耐药细胞中P-gp、MRP1和PD-L1表达较亲本细胞上调(P均<0.01).沉默PD-L1表达后,Hep3B-SR和HepG2-SR的耐药指数分别下降为1.8和1.5,P-gp和MRP1的表达下调(P均<0.01);沉默PD-L1表达可抑制耐药细胞的增殖、迁移、克隆形成并促进其凋亡(P均<0.01),合用索拉非尼时作用更为显著.结论 PD-L1在索拉非尼耐药人肝癌细胞中高表达;抑制PD-L1表达可部分逆转索拉非尼耐药人肝癌细胞的耐药性,提高索拉非尼的抗癌效果;抑制PD-L1表达可有效抑制索拉非尼耐药人肝癌细胞的生长,合用索拉非尼其抗癌效果更强.
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