【摘 要】
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目的以pcDNA3．1（＋）为骨架，构建并鉴定人脑胶质瘤组织中含R132H突变的人源异柠檬酸脱氢酶1基因（h1DH1R132H）和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）序列的双顺反子真核表达载体。方法以内部核糖体
【机 构】
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苏州大学附属第一医院,盐城市第一人民医院
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目的以pcDNA3．1（＋）为骨架，构建并鉴定人脑胶质瘤组织中含R132H突变的人源异柠檬酸脱氢酶1基因（h1DH1R132H）和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）序列的双顺反子真核表达载体。方法以内部核糖体进入位点（IRES）／EGFP片段为模板，扩增出IRES／EGFP片段，并在5’末端引入3×Flag标签；通过PCR介导的定点突变法，以pCMV—sports6．h1DH1为模板，扩增h1DH1R132H基因片段，并在3’末端引入3×Flag标签；通过PCR连接两种产物后经双酶切定向克
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