【摘 要】
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目的寻找人胚胎干细胞(hESC)建系材料来源。方法选用IVF低形态学评分的D3胚胎行序贯囊胚培养,用免疫外科的方法去除滋养细胞,将得到的内细胞团(ICM)接种于丝裂霉素C灭活的小
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院康复科; 华中科技大学同济医学院附属同济医院生殖医学中心; 华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科; 华中科技大学同济医学院附属同济医
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30370505,30600188)
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目的寻找人胚胎干细胞(hESC)建系材料来源。方法选用IVF低形态学评分的D3胚胎行序贯囊胚培养,用免疫外科的方法去除滋养细胞,将得到的内细胞团(ICM)接种于丝裂霉素C灭活的小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)上培养5-8d,每4-7d传代1次,分别取不同代的hESC进行碱性磷酸酶(AKP)染色、转录因子OCT-4、阶段特异性胚胎抗原(SSEA)SSEA-4、SSEA-1、肿瘤排斥抗原(TRA)TRA-1-60、TAR-1-81、核型及体内外分化全能性鉴定。结果130枚废弃的D3低形态学评分(评分<16)的胚胎培养出囊胚19枚,获得原代克隆5个,成功培养出两株hESC系,它们具有hESC的共同的生物学特性。结论部分低形态学评分的D3废弃胚胎可发育成囊胚。囊胚形成率与形态学评分相关,这些胚胎可作为建立hESC系的材料来源之一。
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