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摘要 采用菌丝生长速率法测定了戊唑醇、苯醚甲环唑、溴菌腈等3种杀菌剂对香樟炭疽病的室内抑制效果。结果表明：在供试的3种杀菌剂中，对香樟炭疽病菌毒力最强的为戊唑醇EC50值为0.5879mg/L，苯醚甲环唑次之为6.6115mg/L，溴菌腈毒力最弱为52.8231mg/L。
关键词 杀菌剂；炭疽菌；毒力测定
由于环境的炭疽病已成为香樟主要病害之一。它是常绿植物，是单位主要的绿化树种。香樟炭疽病在广东、广西、海南、湖南、云南和福建等地常有发生。本病在苗圃或幼林危害较重，大树较轻。发病植株生长衰弱，枯枝、枯梢多，幼树多从顶枝梢逐渐返枯至树干基部，严重的树整株死亡。
本病症状主要特征是枯梢。叶片、果实上的病斑圆形，融合后呈不规则形，暗褐色至黑色，嫩叶皱缩变形，潮湿天气，在病嫩茎、病叶上常看到淡桃红色的点状物，此为病菌的分生孢子盘。幼嫩枝干上的病斑开始时圆形或椭圆形，大小不一，初为紫褐色，渐变黑褐色，病部稍下陷，以后病斑连结融合，若绕枝条一圈，枝条上部变黑干枯，重病株病斑沿主干向下蔓延，最后整株死 亡。春夏之交，病部有时长出球形黑色小点，此为病菌的子囊壳。
香樟炭疽病的发生严重影响了香樟的生长，影响绿化，它的防治始终是人们研究和关注的重点。化学防治是控制炭疽病发生、减少损失的最有效途径之一。但一些常用药剂如井冈霉素等的长期使用，已经引起了严重的抗药性问题。通过菌丝生长速率法，测定了戊唑醇、苯醚甲环唑、溴菌腈等3种杀菌剂对炭疽菌的室内抑制效果，以筛选药剂为防治炭疽病的防治提供有价值的理论和实践依据。
1 材料与方法
1.1 供试病原菌
供试病原菌为香樟炭疽病叶片，这些叶片在较长一段时间内未使用任何杀菌剂。
1.2 供试培养基
本次实验所用的培养基：琼脂16 g，马铃薯200 g，葡萄糖18 g，水1000 ml， pH无需调制。
1.3 供试药剂
30%戊唑醇可湿性粉剂（山东华阳农药化工集团有限公司）、20%苯醚甲环唑水分散颗粒剂（北京中农方圆科技发展有限公司）、70%溴菌腈可湿性粉剂（江苏托球农化有限公司）
30%戊唑醇处理剂量为125，250，500，1000，2000mg/L
20%苯醚甲环唑处理剂量为250，500，1000，2000，4000mg/L
70%溴菌腈可湿性粉剂处理剂量为62.5，125，250，500，1000mg/L
1.4主要仪器和材料
立式压力蒸汽灭菌锅 超净工作台 智能人工气候箱 三角瓶 移液管 培 养皿 打孔器等
1.5 试验方法
按常规方法制好培养基备用，采集发病期的叶片，病健交界处切取0.5cm*0.5cm，用75%酒精消毒15秒，再用无菌水冲洗3次，干后放置在培养中央，在25℃培养3-5天观察。等长出菌落，挑取炭疽病孢子团放在培养平板中央，放在恒温培养箱中，在25℃下培养几天数日备用。
每个三角瓶中分别装90ml的培养基。封口灭菌。每种杀菌剂设定5个质量浓度梯度相邻递度相差2倍。用无菌水配制。待培养基冷却到50℃左右，将不同浓度药液分别量取10ml加入到三角瓶中，混匀后分别装至5个培养皿中，同时设置无菌水为对照。
用5mm打孔器消毒后在供试菌种边缘取下菌块即菌饼，再用接种铲将菌块有菌丝的一面向下与培养基粘合，做上标记在25℃的恒温培养箱中培养7天。采用十字交叉测量菌落生长直径。
1.6数据处理
抑制生长率= ×100%
将抵制生长率转换成抵制机率值-纵坐标，杀菌剂质量浓度转换成对数值-横坐标求出公式相关，再求出抵制有效中浓度即EC50值。
2 结果与分析
2.1 3种杀菌剂对香樟炭疽病菌菌丝生长的影响见下表
不同杀菌剂对香樟炭疽病菌菌丝生长的抵制效果
20%苯醚甲环唑处理剂量为250，500，1000，2000，4000mg/L分别对应的的生长抑制率%为78.4，84.9，87. 9，90，92.6。
30%戊唑醇處理剂量为125，250，500，1000，2000mg/L分别对应的的生长抑制率%为84，85. 9，88. 8，91. 4，94
70%溴菌腈可湿性粉剂处理剂量为62.5，125，250，500，1000mg/L分别对应的的生长抑制率%为61.4，67. 5，75. 3，80，87.5
从上表可以看出各杀菌剂效果明显，都有抵制作用。
不同杀菌剂对香樟炭疽病菌EC50比较
3种杀菌剂分别在5种不同质量浓度下抑制情况，与对照相比都有显著差异。30%戊唑醇在质量浓度为2000mg/L抑菌率为94%，20%苯醚甲环唑在质量浓度4000mg/L抑菌率为92.6%，70%溴菌腈在质量浓度1000mg/L抑菌率为87.5%。说明三种杀菌剂对香樟炭疽病菌具有很好的防治效果。
经计算，3种杀菌剂浓度对数与生长抑制率值之间为线性相关。
20%苯醚甲环唑的回归方程为y=0.5242x+4.57，EC50值（mg/L）为6.6115，回归系数R2为0.9785
30%戊唑醇的回归方程为y=0.4708x+5.1086，EC50值（mg/L）为0.5879，回归系数R2为0.9769
70%溴菌腈的回归方程为y=0.7006x+3.793，EC50值（mg/L）为52.8213，回归系数R2为0.9868
毒力回归方程的相关系数接近1，即每种杀菌剂不同浓度间的抑菌率相关性高。从上面毒力回归结果可知，30%戊唑醇抑制作用最强，20%苯醚甲环唑抑制用次之，70%溴菌腈抑制作用最弱。
3 结论与讨论
试验结果得知：30%戊唑醇抑制作用最强。3种杀菌剂在较高质量浓度对香樟炭疽病菌表现出较好的抑制作用。因此，30%戊唑醇、20%苯醚甲环唑和70%溴菌腈建议使用浓度分别为2000mg/L、4000mg/L、1000mg/L
以上只是进行了室内毒力测定，还需在室外进行田间试验，以最终决定使用浓度和实际药效。
4 参考文献
[1] 沈晋亮.农药生物测定[M].中国农业出版社，2013：14.
[2] 赵茂俊，张志明，李晚忱等.玉米纹枯病研究进展[J].植物保护，2006，32（1）：5-8.
关键词 杀菌剂；炭疽菌；毒力测定
由于环境的炭疽病已成为香樟主要病害之一。它是常绿植物，是单位主要的绿化树种。香樟炭疽病在广东、广西、海南、湖南、云南和福建等地常有发生。本病在苗圃或幼林危害较重，大树较轻。发病植株生长衰弱，枯枝、枯梢多，幼树多从顶枝梢逐渐返枯至树干基部，严重的树整株死亡。
本病症状主要特征是枯梢。叶片、果实上的病斑圆形，融合后呈不规则形，暗褐色至黑色，嫩叶皱缩变形，潮湿天气，在病嫩茎、病叶上常看到淡桃红色的点状物，此为病菌的分生孢子盘。幼嫩枝干上的病斑开始时圆形或椭圆形，大小不一，初为紫褐色，渐变黑褐色，病部稍下陷，以后病斑连结融合，若绕枝条一圈，枝条上部变黑干枯，重病株病斑沿主干向下蔓延，最后整株死 亡。春夏之交，病部有时长出球形黑色小点，此为病菌的子囊壳。
香樟炭疽病的发生严重影响了香樟的生长，影响绿化，它的防治始终是人们研究和关注的重点。化学防治是控制炭疽病发生、减少损失的最有效途径之一。但一些常用药剂如井冈霉素等的长期使用，已经引起了严重的抗药性问题。通过菌丝生长速率法，测定了戊唑醇、苯醚甲环唑、溴菌腈等3种杀菌剂对炭疽菌的室内抑制效果，以筛选药剂为防治炭疽病的防治提供有价值的理论和实践依据。
1 材料与方法
1.1 供试病原菌
供试病原菌为香樟炭疽病叶片，这些叶片在较长一段时间内未使用任何杀菌剂。
1.2 供试培养基
本次实验所用的培养基：琼脂16 g，马铃薯200 g，葡萄糖18 g，水1000 ml， pH无需调制。
1.3 供试药剂
30%戊唑醇可湿性粉剂（山东华阳农药化工集团有限公司）、20%苯醚甲环唑水分散颗粒剂（北京中农方圆科技发展有限公司）、70%溴菌腈可湿性粉剂（江苏托球农化有限公司）
30%戊唑醇处理剂量为125，250，500，1000，2000mg/L
20%苯醚甲环唑处理剂量为250，500，1000，2000，4000mg/L
70%溴菌腈可湿性粉剂处理剂量为62.5，125，250，500，1000mg/L
1.4主要仪器和材料
立式压力蒸汽灭菌锅 超净工作台 智能人工气候箱 三角瓶 移液管 培 养皿 打孔器等
1.5 试验方法
按常规方法制好培养基备用，采集发病期的叶片，病健交界处切取0.5cm*0.5cm，用75%酒精消毒15秒，再用无菌水冲洗3次，干后放置在培养中央，在25℃培养3-5天观察。等长出菌落，挑取炭疽病孢子团放在培养平板中央，放在恒温培养箱中，在25℃下培养几天数日备用。
每个三角瓶中分别装90ml的培养基。封口灭菌。每种杀菌剂设定5个质量浓度梯度相邻递度相差2倍。用无菌水配制。待培养基冷却到50℃左右，将不同浓度药液分别量取10ml加入到三角瓶中，混匀后分别装至5个培养皿中，同时设置无菌水为对照。
用5mm打孔器消毒后在供试菌种边缘取下菌块即菌饼，再用接种铲将菌块有菌丝的一面向下与培养基粘合，做上标记在25℃的恒温培养箱中培养7天。采用十字交叉测量菌落生长直径。
1.6数据处理
抑制生长率= ×100%
将抵制生长率转换成抵制机率值-纵坐标，杀菌剂质量浓度转换成对数值-横坐标求出公式相关，再求出抵制有效中浓度即EC50值。
2 结果与分析
2.1 3种杀菌剂对香樟炭疽病菌菌丝生长的影响见下表
不同杀菌剂对香樟炭疽病菌菌丝生长的抵制效果
20%苯醚甲环唑处理剂量为250，500，1000，2000，4000mg/L分别对应的的生长抑制率%为78.4，84.9，87. 9，90，92.6。
30%戊唑醇處理剂量为125，250，500，1000，2000mg/L分别对应的的生长抑制率%为84，85. 9，88. 8，91. 4，94
70%溴菌腈可湿性粉剂处理剂量为62.5，125，250，500，1000mg/L分别对应的的生长抑制率%为61.4，67. 5，75. 3，80，87.5
从上表可以看出各杀菌剂效果明显，都有抵制作用。
不同杀菌剂对香樟炭疽病菌EC50比较
3种杀菌剂分别在5种不同质量浓度下抑制情况，与对照相比都有显著差异。30%戊唑醇在质量浓度为2000mg/L抑菌率为94%，20%苯醚甲环唑在质量浓度4000mg/L抑菌率为92.6%，70%溴菌腈在质量浓度1000mg/L抑菌率为87.5%。说明三种杀菌剂对香樟炭疽病菌具有很好的防治效果。
经计算，3种杀菌剂浓度对数与生长抑制率值之间为线性相关。
20%苯醚甲环唑的回归方程为y=0.5242x+4.57，EC50值（mg/L）为6.6115，回归系数R2为0.9785
30%戊唑醇的回归方程为y=0.4708x+5.1086，EC50值（mg/L）为0.5879，回归系数R2为0.9769
70%溴菌腈的回归方程为y=0.7006x+3.793，EC50值（mg/L）为52.8213，回归系数R2为0.9868
毒力回归方程的相关系数接近1，即每种杀菌剂不同浓度间的抑菌率相关性高。从上面毒力回归结果可知，30%戊唑醇抑制作用最强，20%苯醚甲环唑抑制用次之，70%溴菌腈抑制作用最弱。
3 结论与讨论
试验结果得知：30%戊唑醇抑制作用最强。3种杀菌剂在较高质量浓度对香樟炭疽病菌表现出较好的抑制作用。因此，30%戊唑醇、20%苯醚甲环唑和70%溴菌腈建议使用浓度分别为2000mg/L、4000mg/L、1000mg/L
以上只是进行了室内毒力测定，还需在室外进行田间试验，以最终决定使用浓度和实际药效。
4 参考文献
[1] 沈晋亮.农药生物测定[M].中国农业出版社，2013：14.
[2] 赵茂俊，张志明，李晚忱等.玉米纹枯病研究进展[J].植物保护，2006，32（1）：5-8.