【摘 要】
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目的 研发基于固相凝集技术的红细胞血型系统IgG型不规则抗体检测试剂盒并评估其性能.方法 采用单克隆抗人-RBC抗体包被96孔微板,按100 μL/孔加入红细胞悬液形成细胞单层,经
【机 构】
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广州血液中心广州市医学(血液安全)重点实验室,广东广州510095
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目的 研发基于固相凝集技术的红细胞血型系统IgG型不规则抗体检测试剂盒并评估其性能.方法 采用单克隆抗人-RBC抗体包被96孔微板,按100 μL/孔加入红细胞悬液形成细胞单层,经过裂解后形成红细胞膜抗原分子单层,加入保护液冷冻干燥后制备成检测用的反应微板;用梯度倍比稀释的多克隆羊抗球蛋白试剂(IgG+C3d/4)与IgG抗-D致敏的O型红细胞反应,筛选构建最佳指示系统;用不同批次的试剂盒检测低效价的IgG抗-D和抗-E,评估试剂盒在保存期内的抗原稳定性;与微柱凝胶抗球蛋白卡、进口同类试剂盒检测不同效价的抗体以测试3者的灵敏度;与进口同类试剂盒对350例血样标本进行检测,以明确2者的检测效能是否一致.结果 20 μg/mL的抗人-RBC抗体溶液能够很好的固定红细胞膜抗原分子单层;稀释16倍的多克隆羊抗球蛋白试剂与致敏红细胞构建的指示系统指示效果最佳;试剂盒中冻干的红细胞膜抗原在6个月的保存期内保持稳定;本研究的试剂盒检测灵敏度高于Capture-R Ready Screen试剂盒和抗球蛋白卡;试剂盒与Capture-R Ready Screen对血样标本检测的阳性一致性百分率为98.0％,阴性一致性百分率为99.66％,总一致性百分率为99.43％.结论 成功研发了基于固相凝集技术的用于红细胞IgG型同种免疫性不规则抗体检测的试剂盒,该试剂盒具有灵敏度好、保存期长、性能稳定等优势,与进口同类试剂盒等效.
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