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目的构建蜱抗凝血肽与RGDS肽重组基因，将其克隆到甲醇酵母，建立分泌表达载体pPIC9K。方法设计、合成蜱抗凝血肽与RGDS肽的双功能分子的重组基因，对人工合成的目的基因片段进行酶切、测序鉴定。运用PCR技术，扩增目的基因，PCR产物经胶回收后克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K，用双酶切和DNA测序鉴定重组质粒。结果PCR、酶切鉴定和DNA测序证明双功能基因重组质粒构建成功。结论该方法能方便、高效地获得所需的多拷贝基因，为下一步在毕赤酵母中表达双功能分子蛋白建立了基础。