【摘 要】
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目的 探讨抗肿瘤坏死因子-α(TNF-α)单抗联合p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)反义寡核苷酸预处理对缺血再灌注肾不同时间肾功能的变化和TNF-α、p38MAPK蛋白表达的影响.方
【机 构】
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272000,济宁市第一人民医院泌尿外科275100,邹城市人民医院泌尿外科;271000,山东省济宁市疾病预防控制中心;
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目的 探讨抗肿瘤坏死因子-α(TNF-α)单抗联合p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)反义寡核苷酸预处理对缺血再灌注肾不同时间肾功能的变化和TNF-α、p38MAPK蛋白表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠120只,按简单随机化分成4组,假手术(Sham)组、缺血再灌注(IR)组、抗TNF-α单抗+缺血再灌注(抗TNF-α单抗+IR)组、抗TNF-α单抗联合p38 MAPK反义寡核苷酸+缺血再灌注(联合预处理+IR)组.每组30只.假手术组于麻醉后分离肾动脉但不夹闭.抗TNF-α单抗+IR组于恢复血供前5 min通过尾静脉注入抗TNF-α单抗(0.1 mg/kg,用0.9％氯化钠溶液稀释至0.1 ml).联合预处理组于恢复血供前5 min通过尾静脉注入抗TNF-α单抗(0.1 mg/kg)和p38 MAPK反义寡核苷酸(5 mg/kg两者用0.9％氯化钠溶液稀释至0.1 ml).IR组于恢复血供前5 min通过尾静脉注入0.1ml 0.9％氯化钠溶液.全自动生化分析仪检测血浆尿素氮和肌酐水平,采用免疫组化二步法检测肾组织TNF-α、p38 MAPK蛋白表达.计量资料采用t检验,计数资料采用x2检验,数据以均数±标准差((x)±s)表示,组间比较采用方差分析.结果 IR组于再灌注后血浆尿素氮在0、1、3、6、12 h分别为(15.86±2.41)、(21.13±2.21)、(25.47±2.29)、(30.51±2.03)、(35.56±2.47) μmol/L、肌酐在0、1、3、6、12 h分别为(25.61±5.40)、(32.48 ±2.30)、(68.20±1.20)、(84.42±2.43)、(96.15±2.23) μmol/L,至12h仍呈升高趋势.联合预处理组再灌注后血浆尿素氮、肌酐上升幅度低于缺血再灌注组相应时间点(P＜0.05).TNF-α蛋白在近端小管上皮细胞表达为著,随着再灌注时间延长的明显增加,再灌注12h时仍呈增高趋势.p38MAPK主要在远端小管上皮细胞表达,再灌注后6h后达高峰.联合预处理组TNF-α、p38MAPK蛋白水平显著低于IR组(P＜0.05).结论 抗TNF-α单抗及p38MAPK反义寡核苷酸联合应用,通过降低TNF-α、p38MAPK蛋白表达水平,减轻肾缺血再灌注损伤.
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