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摘要：目的：探讨苦参中苦参碱的测定方法。
方法：采用高效液相色谱法（HPLC法），用Zorbax NH3（4.6mm×1.5mm）色谱柱，以乙腈-无水乙醇-水（80∶10∶10）为流动相，磷酸调PH=2，流速为1.0ml/min，柱温为50℃，检测波长为210nm。
结果：苦参碱在0.0141～0.0865mg/ml之间与峰面积积分值呈良好的线性关系（r=0.9962），平均加样回收率98.15%，RSD=1.42%。
结论：HPLC法操作简便，结果准确，可用于苦参中苦参碱的含量测定。
关键词：高效液相色谱法苦参碱含量测定
【中图分类号】R9【文献标识码】B【文章编号】1671-8801（2013）03-0285-01
苦参[1]为豆科槐属（Leguminosae）植物Sophora flavescens Ait的干燥根，性寒，味苦。具有清热燥湿，杀虫，利尿等功效，主要作用有以下几点：①用于湿热泻痢，便血，黄疸；②用于湿热带下，阴肿阴痒，疥癣；③用于湿热小便不利。本品含20多种生物碱，主要为苦参碱、氧化苦参碱，由于苦参药材中主要含有生物碱和黄酮两大类化学成分，其中生物碱中又以苦参碱和氧化苦参碱的含量较高，多作为控制质量的有效成分[2，3]。本文采用高效液相色谱法对苦参中苦参碱的含量进行测定，结果表明：该法操作简便、快速、准确，适用于对苦参药材的质量控制。
1实验仪器、药品
苦参碱对照品（批号：110805-200306）和氧化苦参碱对照品（批号：110780-200405）供含量测定用，中国药品生物制品检定所；苦参药材购于贵阳市花果园药材批发市场，经中药鉴定教研室刘芃教授鉴定为豆科槐属（Leguminosae）植物苦参Sophora flavescens Ait的干燥根；高效液相色谱仪（LC5A），日本岛津；所用试剂均为分析纯。
2溶液、试液配制
2.1对照品溶液的制备。取经五氧化二磷减压干燥至恒重的苦参碱对照品和氧化苦参碱对照品，分别精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释到刻度，摇匀，得到浓度为0.4024mg·ml-1的苦参碱对照品溶液，然后各精密吸取1ml对照品溶液至100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释到刻度，摇匀，最终得到浓度为4.024μg·ml-1的苦参碱对照品溶液。
2.2供试品溶液的制备。称取苦参块约50g，精密称定，加入8倍量PH=4.5的酸水，置于50℃的恒温水浴内浸泡15min，电炉加热至沸，微沸30min，取出滤液；药渣再分别煎煮两次，每次加入8倍量的酸水，煎煮30min，合并三次滤液，浓缩至250ml左右，3000r/min离心10min，转移到250ml容量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀，用10ml移液管精密吸取10ml水提液倒入分液漏斗中，加入氨水用酸度计调PH=10左右，用60ml氯仿分三次萃取，合并氯仿层，挥干，加入甲醇溶解，定容到10ml容量瓶中，即得。
3含量测定方法[4，5]
采用高效液相色谱法测定苦参中苦参碱的含量。
3.1色谱条件。色谱柱：Zorbax NH3（4.6mm×1.5mm）；柱温：50℃；流动相：乙腈-无水乙醇-水（80∶10∶10），磷酸调PH=2；流速：1.0ml/min；检测波长210nm。
4讨论
4.1利用高效液相色谱法对苦参药材中的主要成分苦参碱进行含量测定，操作简便，分离效果好，稳定性和重复性好，可作质量控制方法。
4.2曾采用乙腈-无水乙醇-水（90∶5∶5）作为流动相，结果峰形不太稳定，改为乙腈-无水乙醇-水（80∶10∶10）后，苦参碱得到良好的分离。
参考文献
[1]李家实主编.中药鉴定学[M].上海科学技术出版社，2001年第1版
[2]金莉霞，崔燕岩.苦参生物碱的高效液相色谱法测定[J].药学学报，1993
[3]李家实.苦参生物碱测定[J].北京中医学院学报，1984
[4]郝学志，刘臣，王新彦.HPLC法测定山豆根中苦参碱和氧化苦参碱的含量[J].方药研究，2002
[5]毛大鸣，林佳任.泻停胶囊中苦参碱的含量测定[J].贵阳中医学院学报，2002
方法：采用高效液相色谱法（HPLC法），用Zorbax NH3（4.6mm×1.5mm）色谱柱，以乙腈-无水乙醇-水（80∶10∶10）为流动相，磷酸调PH=2，流速为1.0ml/min，柱温为50℃，检测波长为210nm。
结果：苦参碱在0.0141～0.0865mg/ml之间与峰面积积分值呈良好的线性关系（r=0.9962），平均加样回收率98.15%，RSD=1.42%。
结论：HPLC法操作简便，结果准确，可用于苦参中苦参碱的含量测定。
关键词：高效液相色谱法苦参碱含量测定
【中图分类号】R9【文献标识码】B【文章编号】1671-8801（2013）03-0285-01
苦参[1]为豆科槐属（Leguminosae）植物Sophora flavescens Ait的干燥根，性寒，味苦。具有清热燥湿，杀虫，利尿等功效，主要作用有以下几点：①用于湿热泻痢，便血，黄疸；②用于湿热带下，阴肿阴痒，疥癣；③用于湿热小便不利。本品含20多种生物碱，主要为苦参碱、氧化苦参碱，由于苦参药材中主要含有生物碱和黄酮两大类化学成分，其中生物碱中又以苦参碱和氧化苦参碱的含量较高，多作为控制质量的有效成分[2，3]。本文采用高效液相色谱法对苦参中苦参碱的含量进行测定，结果表明：该法操作简便、快速、准确，适用于对苦参药材的质量控制。
1实验仪器、药品
苦参碱对照品（批号：110805-200306）和氧化苦参碱对照品（批号：110780-200405）供含量测定用，中国药品生物制品检定所；苦参药材购于贵阳市花果园药材批发市场，经中药鉴定教研室刘芃教授鉴定为豆科槐属（Leguminosae）植物苦参Sophora flavescens Ait的干燥根；高效液相色谱仪（LC5A），日本岛津；所用试剂均为分析纯。
2溶液、试液配制
2.1对照品溶液的制备。取经五氧化二磷减压干燥至恒重的苦参碱对照品和氧化苦参碱对照品，分别精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释到刻度，摇匀，得到浓度为0.4024mg·ml-1的苦参碱对照品溶液，然后各精密吸取1ml对照品溶液至100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释到刻度，摇匀，最终得到浓度为4.024μg·ml-1的苦参碱对照品溶液。
2.2供试品溶液的制备。称取苦参块约50g，精密称定，加入8倍量PH=4.5的酸水，置于50℃的恒温水浴内浸泡15min，电炉加热至沸，微沸30min，取出滤液；药渣再分别煎煮两次，每次加入8倍量的酸水，煎煮30min，合并三次滤液，浓缩至250ml左右，3000r/min离心10min，转移到250ml容量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀，用10ml移液管精密吸取10ml水提液倒入分液漏斗中，加入氨水用酸度计调PH=10左右，用60ml氯仿分三次萃取，合并氯仿层，挥干，加入甲醇溶解，定容到10ml容量瓶中，即得。
3含量测定方法[4，5]
采用高效液相色谱法测定苦参中苦参碱的含量。
3.1色谱条件。色谱柱：Zorbax NH3（4.6mm×1.5mm）；柱温：50℃；流动相：乙腈-无水乙醇-水（80∶10∶10），磷酸调PH=2；流速：1.0ml/min；检测波长210nm。
4讨论
4.1利用高效液相色谱法对苦参药材中的主要成分苦参碱进行含量测定，操作简便，分离效果好，稳定性和重复性好，可作质量控制方法。
4.2曾采用乙腈-无水乙醇-水（90∶5∶5）作为流动相，结果峰形不太稳定，改为乙腈-无水乙醇-水（80∶10∶10）后，苦参碱得到良好的分离。
参考文献
[1]李家实主编.中药鉴定学[M].上海科学技术出版社，2001年第1版
[2]金莉霞，崔燕岩.苦参生物碱的高效液相色谱法测定[J].药学学报，1993
[3]李家实.苦参生物碱测定[J].北京中医学院学报，1984
[4]郝学志，刘臣，王新彦.HPLC法测定山豆根中苦参碱和氧化苦参碱的含量[J].方药研究，2002
[5]毛大鸣，林佳任.泻停胶囊中苦参碱的含量测定[J].贵阳中医学院学报，2002