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[摘 要]目的：探究罗红霉素片在检测的过程中所应用到的方法，同时分析罗红霉素分散片如何进行溶出度的测定。方法：在进行检测的过程中，选用合适的溶出介质，通常以醋酸盐缓冲液为主，其中溶出介质的酸碱值为5.5，在45min后进行取样处理，对取样进行高效液相色谱法进行进一步的分析。结果：通过利用色谱法进行分析处理，罗红霉素片的回收率可以达到99%以上，而罗红霉素的分散片的回收率也在99%以上，具有明显的效果。结论：采用高效液相色谱法对以上两种药品进行溶出度的试验，均具有理想的效果，并且没有不良因素的出现，因此可以在今后的试验中加以推广，准确性较高，结果相对完善。
[关键词]罗红霉素片；罗红霉素分散片；溶出度；色谱法；高效液相
中图分类号：U467 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）04-0336-01
在我国的医药行业中，罗红霉素以及罗红霉素分散片的溶出度试验是一项难以处理的试验，因为在当前的试验阶段中，溶出度的检测方法比较单一，使用硫酸显色的方式不能保证结果的准确真实，可以说是一种缺少专属性的检测方法，而在科学技术发展的过程中，硫酸显色的方式逐渐转化为菏移比色法，该方法与原有的方式相比较，得到了一定的进步，但是仍然不能改变试验结果不理想的问题，针对这项试验的提出，我国的相关工作者经过不懈的努力，发现应用高效液相色谱法进行的试验具有准确率高、效果显著的特点，并且得到了验证，在今后的试验中可以进一步应用。
1、 仪器与试药
1.1 仪器
本文中进行的试验均采用天津某仪器制造公司所生产的智能型仪器，该药物溶出仪的分析结果准确。另外，还选用了某种型号的液相色谱仪，该仪器是本试验中的重点，其中分别包含了两个组成部分，其一是真空脱气机，其二是自动进样系统，真正意义上实现了自动化的试验。
1.2 试药
在试药的选择上，包含了罗红霉素以及相应的分散片等多种药品，其中罗红霉素以及罗红霉素分散片是主要的试药成分，其他的试药还包含乙腈、纯化水等，其中乙腈为色谱纯，而磷酸二氢铵为分析纯，在试验中均属于重要的物质成分，罗红霉素以及分散片选用的药品生产厂家来自全国各地的不同省市，前者来自17家制药公司，后者来自于13家制药公司，具有一定的差异性。
2、方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：岛津Shin VP-ODS柱（4.6mm×150mm，5μm）；流动相：0.067mol·L-1磷酸二氢铵溶液（用三乙胺调节pH至6.5）—乙腈（65：35）；流速：1.0mL·min-1；检测波长：210nm；进样量：20μL。
2.2 溶出度测定方法
根据国家对试验的相关规定，在进行试验前首先取一定容量的试药，测定方法根据药典中的要求进行，选用醋酸盐缓冲液作为其中的溶出介质，pH值为5.5，呈酸性，醋酸盐缓冲液中所包含的成分有醋酸钠溶液，取适量的溶液进行稀释，将其调至试验中所需要的酸碱值，在此基础上，分别选用规格为500mg以及600mg的介质进行试验，并且进行验证，保证纯度符合试验中的要求。根据上述方法进行操作后，等待45min，将溶液取出，并且进行过滤处理，将续滤液作为进行试验的试品溶液，同时将试药中的罗红霉素与对照品相比较，取出一定的容量，进行精准的测量，保证数量的准确性，在此基础上，再将取出的罗红霉素进行稀释，将其稀释成两种不同的规格，一种规格为75mg，另一种规格为50mg，以便试验中的需要，其中每毫升的含量不应超过0.16mg，将这两种规格的试剂作为对照品放置在固定的位置上，以备后续之用。根据本文中2.1的要求，从两种溶液中分别取出适量的溶液20μL，并将其注入仪器中，也就是高效液相色谱仪，根据色谱仪中的数据显示将数据记录下来，并进行进一步的观察分析，根据国际上相关规定的算法，最终计算出每片罗红霉素的溶出量。
2.3 线性关系考察
取罗红霉素对照品适量，精密称定，用醋酸盐缓冲液（pH5.5）溶解并稀释制成浓度为20，40，80，120，160，200μg·mL-1的系列浓度溶液，照“2.1”项色谱条件测定。结果回归方程：A=-0.355+1.827C，r=0.9999。实验结果表明，对照品溶液浓度在20～200μg·mL-1范围内与峰面积有良好的线性关系。
2.4 辅料干扰实验
按片剂和分散片处方比例，制成不含主药的空白样品，取适量，加醋酸盐缓冲液（pH5.5）适量，超声振荡，并稀释至规定浓度，摇匀。滤过，取滤液照“2.1”项色谱条件測定，结果辅料无干扰。
2.5 回收率实验
按片剂和分散片处方比，分别精密称取相当于样品标示量的50%，80%，100%罗红霉素对照品及相应量的空白辅料，加醋酸盐缓冲液（pH5.5）适量，振摇使罗红霉素溶解，并加醋酸盐缓冲液（pH5.5）至规定浓度，摇匀，滤过，照“2.1”项色谱条件测定，对本法的准确性进行考察。结果片剂平均回收率99.6%（RSD=0.8%），分散片的平均回收率为99.4%（RSD=0.9%）。
2.6 溶液的稳定性考察
取罗红霉素对照品溶液，按上述色谱条件进行测定，分别于0，3，6h测定峰面积。结果RSD为0.21%，溶液在6h内稳定。
2.7 溶出曲线的绘制
取本品，照“2.2”项方法测定，在5，10，15，30，45和60min时，分别取溶液5mL，滤过，取续滤液作为供试品溶液；并及时在操作容器中补充溶出介质5mL。计算出每片在不同时间的溶出量。实验结果见图1，2和表1，2。根据溶出曲线试验结果，将取样时间定为45min。
2.8 样品的溶出度测定结果
取国内17家主要生产罗红霉素片及13家主要生产罗药霉素分散片的厂家的样品，照确定的溶出度检查方法测定，测得溶出度结果见表3，4。根据国内主要生产厂家的样品溶出度检查结果，将溶出度检查限度确定为80%。
3、讨论
3.1 溶出介质的选择
《中华人民共和国药典》2005年版二部罗红霉素片及罗红霉素分散片溶出度检查用的溶出介质为0.01mol·L-1盐酸溶液。经实验，罗红霉素在0.01mol·L-1盐酸溶液中不稳定，因此实验用新的溶出介质。罗红霉素在水中不溶，在0.01mol·L-1盐酸溶液中溶解但不稳定，参照同类药阿奇霉素和克拉霉素口服制剂溶出度检查用的溶出介质，选择用缓冲液作为溶出介质。试验了0.1mol·L-1磷酸盐缓冲液（pH6.0）和0.1mol·L-1醋酸盐缓冲液（pH5.5），结果用醋酸盐缓冲液较理想。因此缓冲液选择用醋酸盐缓冲液。
3.2 缓冲液浓度的选择
笔者观察了浓度对溶出度的影响，缓冲液浓度分别为0.025，0.038，0.050，0.075，0.100，0.200mol·L-1，结果表明随着缓冲液浓度的增大，制剂不易崩解，但浓度为0.038mol·L-1时，罗红霉素片和分散片溶出度最大。因此缓冲液浓度选择用0.04mol·L-1。
参考文献
[1] 杨德智，徐维盛，张丽，杨世颖，吕扬.优化《中国药典》罗红霉素HPLC含量测定方法研究[J].中国药房.2011（17）.
[2] 洪利娅，孙晓明，王建.高效液相色谱法测定罗红霉素片与罗红霉素分散片溶出度[J].医药导报.2011（02）.
[3] 钱锋.HPLC法测定罗红霉素片的溶出度[J].中国药品标准.2009（05）.
[关键词]罗红霉素片；罗红霉素分散片；溶出度；色谱法；高效液相
中图分类号：U467 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）04-0336-01
在我国的医药行业中，罗红霉素以及罗红霉素分散片的溶出度试验是一项难以处理的试验，因为在当前的试验阶段中，溶出度的检测方法比较单一，使用硫酸显色的方式不能保证结果的准确真实，可以说是一种缺少专属性的检测方法，而在科学技术发展的过程中，硫酸显色的方式逐渐转化为菏移比色法，该方法与原有的方式相比较，得到了一定的进步，但是仍然不能改变试验结果不理想的问题，针对这项试验的提出，我国的相关工作者经过不懈的努力，发现应用高效液相色谱法进行的试验具有准确率高、效果显著的特点，并且得到了验证，在今后的试验中可以进一步应用。
1、 仪器与试药
1.1 仪器
本文中进行的试验均采用天津某仪器制造公司所生产的智能型仪器，该药物溶出仪的分析结果准确。另外，还选用了某种型号的液相色谱仪，该仪器是本试验中的重点，其中分别包含了两个组成部分，其一是真空脱气机，其二是自动进样系统，真正意义上实现了自动化的试验。
1.2 试药
在试药的选择上，包含了罗红霉素以及相应的分散片等多种药品，其中罗红霉素以及罗红霉素分散片是主要的试药成分，其他的试药还包含乙腈、纯化水等，其中乙腈为色谱纯，而磷酸二氢铵为分析纯，在试验中均属于重要的物质成分，罗红霉素以及分散片选用的药品生产厂家来自全国各地的不同省市，前者来自17家制药公司，后者来自于13家制药公司，具有一定的差异性。
2、方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：岛津Shin VP-ODS柱（4.6mm×150mm，5μm）；流动相：0.067mol·L-1磷酸二氢铵溶液（用三乙胺调节pH至6.5）—乙腈（65：35）；流速：1.0mL·min-1；检测波长：210nm；进样量：20μL。
2.2 溶出度测定方法
根据国家对试验的相关规定，在进行试验前首先取一定容量的试药，测定方法根据药典中的要求进行，选用醋酸盐缓冲液作为其中的溶出介质，pH值为5.5，呈酸性，醋酸盐缓冲液中所包含的成分有醋酸钠溶液，取适量的溶液进行稀释，将其调至试验中所需要的酸碱值，在此基础上，分别选用规格为500mg以及600mg的介质进行试验，并且进行验证，保证纯度符合试验中的要求。根据上述方法进行操作后，等待45min，将溶液取出，并且进行过滤处理，将续滤液作为进行试验的试品溶液，同时将试药中的罗红霉素与对照品相比较，取出一定的容量，进行精准的测量，保证数量的准确性，在此基础上，再将取出的罗红霉素进行稀释，将其稀释成两种不同的规格，一种规格为75mg，另一种规格为50mg，以便试验中的需要，其中每毫升的含量不应超过0.16mg，将这两种规格的试剂作为对照品放置在固定的位置上，以备后续之用。根据本文中2.1的要求，从两种溶液中分别取出适量的溶液20μL，并将其注入仪器中，也就是高效液相色谱仪，根据色谱仪中的数据显示将数据记录下来，并进行进一步的观察分析，根据国际上相关规定的算法，最终计算出每片罗红霉素的溶出量。
2.3 线性关系考察
取罗红霉素对照品适量，精密称定，用醋酸盐缓冲液（pH5.5）溶解并稀释制成浓度为20，40，80，120，160，200μg·mL-1的系列浓度溶液，照“2.1”项色谱条件测定。结果回归方程：A=-0.355+1.827C，r=0.9999。实验结果表明，对照品溶液浓度在20～200μg·mL-1范围内与峰面积有良好的线性关系。
2.4 辅料干扰实验
按片剂和分散片处方比例，制成不含主药的空白样品，取适量，加醋酸盐缓冲液（pH5.5）适量，超声振荡，并稀释至规定浓度，摇匀。滤过，取滤液照“2.1”项色谱条件測定，结果辅料无干扰。
2.5 回收率实验
按片剂和分散片处方比，分别精密称取相当于样品标示量的50%，80%，100%罗红霉素对照品及相应量的空白辅料，加醋酸盐缓冲液（pH5.5）适量，振摇使罗红霉素溶解，并加醋酸盐缓冲液（pH5.5）至规定浓度，摇匀，滤过，照“2.1”项色谱条件测定，对本法的准确性进行考察。结果片剂平均回收率99.6%（RSD=0.8%），分散片的平均回收率为99.4%（RSD=0.9%）。
2.6 溶液的稳定性考察
取罗红霉素对照品溶液，按上述色谱条件进行测定，分别于0，3，6h测定峰面积。结果RSD为0.21%，溶液在6h内稳定。
2.7 溶出曲线的绘制
取本品，照“2.2”项方法测定，在5，10，15，30，45和60min时，分别取溶液5mL，滤过，取续滤液作为供试品溶液；并及时在操作容器中补充溶出介质5mL。计算出每片在不同时间的溶出量。实验结果见图1，2和表1，2。根据溶出曲线试验结果，将取样时间定为45min。
2.8 样品的溶出度测定结果
取国内17家主要生产罗红霉素片及13家主要生产罗药霉素分散片的厂家的样品，照确定的溶出度检查方法测定，测得溶出度结果见表3，4。根据国内主要生产厂家的样品溶出度检查结果，将溶出度检查限度确定为80%。
3、讨论
3.1 溶出介质的选择
《中华人民共和国药典》2005年版二部罗红霉素片及罗红霉素分散片溶出度检查用的溶出介质为0.01mol·L-1盐酸溶液。经实验，罗红霉素在0.01mol·L-1盐酸溶液中不稳定，因此实验用新的溶出介质。罗红霉素在水中不溶，在0.01mol·L-1盐酸溶液中溶解但不稳定，参照同类药阿奇霉素和克拉霉素口服制剂溶出度检查用的溶出介质，选择用缓冲液作为溶出介质。试验了0.1mol·L-1磷酸盐缓冲液（pH6.0）和0.1mol·L-1醋酸盐缓冲液（pH5.5），结果用醋酸盐缓冲液较理想。因此缓冲液选择用醋酸盐缓冲液。
3.2 缓冲液浓度的选择
笔者观察了浓度对溶出度的影响，缓冲液浓度分别为0.025，0.038，0.050，0.075，0.100，0.200mol·L-1，结果表明随着缓冲液浓度的增大，制剂不易崩解，但浓度为0.038mol·L-1时，罗红霉素片和分散片溶出度最大。因此缓冲液浓度选择用0.04mol·L-1。
参考文献
[1] 杨德智，徐维盛，张丽，杨世颖，吕扬.优化《中国药典》罗红霉素HPLC含量测定方法研究[J].中国药房.2011（17）.
[2] 洪利娅，孙晓明，王建.高效液相色谱法测定罗红霉素片与罗红霉素分散片溶出度[J].医药导报.2011（02）.
[3] 钱锋.HPLC法测定罗红霉素片的溶出度[J].中国药品标准.2009（05）.