【摘 要】
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目的 观察氯化镧水杨酸8-羟基喹啉三元稀土配合物[La(C7H5O3)2·(C9H6NO)],对重组Fas基因酵母的促凋亡作用.方法 抽提Jurkat细胞RNA;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)制备Jurkat
【机 构】
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湘南学院化学与生命科学系药学教研室,湖南,郴州,423000;湘南学院图书馆;湖南省郴州市第一人民医院检验科
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目的 观察氯化镧水杨酸8-羟基喹啉三元稀土配合物[La(C7H5O3)2·(C9H6NO)],对重组Fas基因酵母的促凋亡作用.方法 抽提Jurkat细胞RNA;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)制备Jurkat细胞的cDNA:PCR扩增人Fas基因;将人Fas基因克隆到pREP3X-HA质粒中构建pREP3X-HA-Fas穿梭载体,电转化穿梭载体到野生型粟酒裂殖酵母细胞中;应用蛋白印迹法(Western blotting)鉴定蛋白表达产物;应用La(Sal)2(Qu)诱导重组Fas酵母产生凋亡应答.结果 经原位末端标记(TUNEL)法显微计数检测发现,对照组细胞膜泡形成、细胞核碎裂和细胞核溶解的细胞各占计数细胞总数的2.80%、3.74%和2.80%,而处理组分别为26.67%、22.86%和13.33%,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞术检测发现,对照组细胞凋亡检出率为1.24%,而处理组为50.17%,差异有统计学意义(P<0.01).结论 La(Sal)2 (Qu)可能通过Fas诱导酵母细胞凋亡.
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